[发明专利]一种高效液相色谱测定烟用甜味剂的方法

权利要求书

1.一种高效液相色谱测定烟用甜味剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）标准工作溶液的配制：

称取待检测甜味剂的标准品，用超纯水定容，再配制出具有浓度梯度的混合标准工作溶液；所述甜味剂为安赛蜜、阿斯巴甜、纽甜、阿力甜和糖精钠；

2）色谱标定：

使用步骤1）配制的标准工作溶液，使用色谱仪进行分析，获得相应的保留时间，并根据标定数据，获得甜味剂标准浓度的线性范围曲线公式：

Ci=Kx+a，其中K为系数，甜味剂的种类不同，K值不同，a为常数，i为甜味剂种类；

5 种甜味剂标准线性方程、相关系数、检出限与定量限

序号	保留时间/min	甜味剂名称	线性方程	相关系数r	①/μg/mL]]>	②/μg/mL]]>
1	3.043	安赛蜜	-5x - 14.085]]>	0.9989	9.06	30.2
2	10.306	阿斯巴甜	-5x + 35.957]]>	0.9997	2.06	6.87
3	12.539	阿力甜	-5x + 23.246]]>	0.9998	1.59	5.31
4	18.595	纽甜	-5x + 28.422]]>	0.9993	0.72	2.42
5	22.802	糖精钠	-5x + 23.115]]>	0.9996	1.39	4.63

注: ①按最低浓度的标准偏差的3倍计算；②按最低浓度的标准偏差的10倍计算；

3）样品的提取：

选取待检测样品，加入设定量的萃取剂后进行机械振荡，静置设定时间后吸取上清液，再经过水相滤膜过滤，作为样品待测液进行色谱分析；所述萃取剂为超纯水；对样品待测液以及配制好的不同浓度的混合标准工作溶液进行HPLC-DAD检测，通过图谱以对烟用接装纸、口用型无烟气烟草制品、烟用香精、烟用爆珠、电子烟液样品中的甜味剂的类型及含量进行定性及定量分析；

4）样品中甜味剂含量按以下公式计算;

Xi=（Ci×V）÷M，其中，Xi为样品中甜味剂i的含量，单位μg /g；Ci为由标准工作曲线得出的样品中甜味剂i的浓度，单位μg /mL；V为萃取剂体积，单位mL；M为样品质量，单位g，i为甜味剂种类；

检测分析时，仪器参数具体参考设置如下：

HPLC-DAD条件：

色谱柱型号为Poroshell 120 EC-C18，3 mm×150 mm, 2.7 μm；柱温：30 ℃；进样量：5μL；流速：0.3 mL/min；流动相：A为0.01%乙酸水溶液，B为甲醇；二极管阵列检测器: 210nm；流动相梯度洗脱条件见表：

流动相梯度洗脱条件

时间min	A%	B%	流量mL/min	压力bar
0	90	10	0.3	600
2	90	10	0.3	600
12	80	20	0.3	600
13	40	60	0.3	600
25	10	90	0.3	600
30	0	100	0.3	600

。

2.根据权利要求1所述的高效液相色谱测定烟用甜味剂的方法，其特征在于，所述水相滤膜为0.22 μm水相滤膜。