[发明专利]DLX1，HOXC6和PCA3在制备前列腺癌标志物中的应用及其试剂盒

说明书

本发明公开了一种DLX1，HOXC6和PCA3在制备前列腺癌标志物中的应用及其试剂盒。该试剂盒使用多重qRT‑PCR技术，在一份尿液样本中同时检测DLX1/HOXC6/PCA3 mRNA，同时以PSA mRNA作参照，建立Logistic回归模型，作为前列腺癌早期诊断标志物。该试剂盒通过多个标志物联合检测，达到了对前列腺癌临床病理结果极高的符合率。

技术领域

本发明涉及一种DLX1，HOXC6和PCA3在制备前列腺癌标志物中的应用及其试剂盒，属于生物医药技术领域。

背景技术

前列腺癌(Prostate Cancer，PCa)是一种严重威胁男性健康的恶性肿瘤，占全球肿瘤发病率第二位、死亡率第六位，我国PCa的发病率平均每年增长4.7％，是增加最快的男性恶性肿瘤。上海市疾病控制中心的资料显示，前列腺癌的发病率自2002年起已跃居男性泌尿生殖系恶性肿瘤的首位。

前列腺特异性抗原(Prostate Specific Antigen,PSA)是全世界应用最广泛的前列腺癌早期诊断指标，PSA升高提示患者可能存在前列腺癌，但PSA升高也往往因其他的前列腺疾病引起。以PSA灰区(4-10ng/ml)为例，这些患者穿刺活检的阳性率只有10-25％。据统计全世界每年接受前列腺穿刺活检，其中75％以上是不必要的，穿刺活检会给患者带来许多并发症，如血尿、败血症、感染等，给患者带来极大的痛苦。虽然PSA应用广泛，但也存在上述等较大问题，亟需新的检测靶标来弥补其缺陷。

尽管现有技术中已经发现了尿液中一些基因的表达与前列腺癌的相关性，但是目前本领域中仍然需要进一步地研究能够切实地应用于前列腺癌诊断的相关基因，以及开发出具有较高的检测准确性的检测试剂，前列腺癌的发生可能受多种基因表达共同影响，因此可以针对肿瘤发生发展的不同阶段，联合进行多基因表达检测，可以明显的提高肿瘤的检出率。

因此，希望提供一种多个前列腺相关基因表达联合检测试剂盒，其能够联合检测多个前列腺癌相关基因表达，可以明显地提高肿瘤的检出率。

发明内容

为了克服上述现有技术中的缺点，本发明提供一种多个前列腺相关基因表达联合检测试剂盒及应用，其能够联合检测前列腺相关基因表达，可以明显地提高肿瘤的检出率，其设计巧妙，使用方便，适于大规模推广应用。

为达到以上目的，本发明提供一种DLX1，HOXC6和PCA3在制备前列腺癌标志物中的应用及其试剂盒。其能够联合检测前列腺相关基因表达，可以明显地提高肿瘤的检出率，其设计巧妙，使用方便，适于大规模推广应用。

DLX1，HOXC6和PCA3在制备诊断前列腺癌标志物中的联合应用，所述DLX1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述HOXC6的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述PCA3的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

优选地，DLX1、HOXC6和PCA3联合应用的判断公式为p＝1/[1+exp(-z)]，z＝1.741*A+0.03*B+0.489*C-4.652,其中A为DLX1得分，B为HOXC6得分，C为PCA3得分，DLX1得分＝DLX1拷贝数/PSA拷贝数；HOXC6得分＝HOXC6拷贝数/PSA拷贝数；PCA3得分＝PCA3拷贝数/PSA拷贝数。

DLX1，HOXC6和PCA3联合检测前列腺癌的试剂盒，包括DLX1 mRNA、HOXC6mRNA和PCA3 mRNA的定量检测试剂；所述DLX1 mRNA定量检测试剂包括SEQ IDNO.9和SEQ ID NO.10所示的检测引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示的TaqMAN探针；所述HOXC6 mRNA定量检测试剂包括如SEQ ID NO.12和SEQ ID NO.13所示的检测引物和核苷酸序列如SEQ IDNO.14所示的TaqMAN探针；所述PCA3 mRNA定量检测试剂包括如SEQID NO.15和SEQ IDNO.16所示的检测引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示的TaqMAN探针。