[发明专利]一种三孢布拉氏霉菌发酵方法及其产品

权利要求书

1.一种三孢布拉氏霉菌发酵方法，其特征在于，所述方法为：以菜籽粕为发酵培养基的主要成分，通过三孢布拉霉发酵获得类胡萝卜素；

所述菜籽粕为经过中性蛋白酶酶解处理的菜籽粕，且在经过中性蛋白酶酶解处理之前，采用纤维素酶和植酸酶先进行初步水解；

所述纤维素酶的添加量按每克菜籽粕计算，为10-150 U/g；纤维素酶水解菜籽粕的温度为40-60℃，pH值为3.5-6.0，时间为1-2 h；

所述植酸酶的添加量按每克菜籽粕计算，为2-10 U/g；植酸酶水解的温度为40-60℃，pH值为3.5-6.0，时间为1-3.5 h；

所述中性蛋白酶的添加量按每克菜籽粕计算为1500-4500 U/g；中性蛋白酶水解菜籽粕的pH值为6-7.5，温度为30-50℃，时间为1-4 h。

2.如权利要求1所述的三孢布拉氏霉菌发酵方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

（1）将三孢布拉氏霉菌进行斜面培养；

（2）将步骤（1）得到的三孢布拉氏霉菌在添加有菜籽粕的种子培养基中进行种子培养，得到三孢布拉氏霉菌种子液；

（3）将步骤（2）得到的三孢布拉氏霉菌种子液在添加有菜籽粕的发酵培养基中进行发酵培养，得到发酵液；

（4）收集步骤（3）得到的发酵液中的菌体，对菌体进行干燥、破壁，经萃取、脱溶处理，得到类胡萝卜素。

3.如权利要求1所述的三孢布拉氏霉菌发酵方法，其特征在于，所述经过酶水解预处理得到的菜籽粕中小肽的质量百分含量为不小于10%。

4.如权利要求1所述的三孢布拉氏霉菌发酵方法，其特征在于，所述经过酶水解预处理得到的菜籽粕中小肽的质量百分含量为不少于18%。

5.如权利要求1所述的三孢布拉氏霉菌发酵方法，其特征在于，所述植酸酶水解的时间为1-2 h。

6.如权利要求1所述的三孢布拉氏霉菌发酵方法，其特征在于，所述植酸酶的水解处理与纤维素酶的水解处理同时进行。

7.如权利要求6所述的三孢布拉氏霉菌发酵方法，其特征在于，所述植酸酶的添加量按每克菜籽粕计算，为2-10 U/g；所述纤维素酶添加量按每克菜籽粕计算，为10-150 U/g。

8.如权利要求6所述的三孢布拉氏霉菌发酵方法，其特征在于，所述水解处理的pH值为3.5-6.0。

9.如权利要求6所述的三孢布拉氏霉菌发酵方法，其特征在于，所述水解处理的温度为40-60℃。

10.如权利要求6所述的三孢布拉氏霉菌发酵方法，其特征在于，所述水解处理的时间为1-2 h。

11.如权利要求2所述的三孢布拉氏霉菌发酵方法，其特征在于，步骤（2）所述种子培养的方法为：取步骤（1）得到的三孢布拉氏霉菌正菌株和负菌株，分别接种于种子培养基中培养。

12.如权利要求11所述的三孢布拉氏霉菌发酵方法，其特征在于，所述种子培养基包括葡萄糖、玉米淀粉、菜籽粕、磷酸二氢钾和硫酸镁。

13.如权利要求12所述的三孢布拉氏霉菌发酵方法，其特征在于，所述菜籽粕的浓度为30-50 g/L。

14.如权利要求11所述的三孢布拉氏霉菌发酵方法，其特征在于，所述种子培养基包括葡萄糖5-15 g/L、玉米淀粉25-35 g/L、菜籽粕30-50 g/L、磷酸二氢钾0.5-2 g/L和硫酸镁0.05-0.2 g/L。

15.如权利要求11所述的三孢布拉氏霉菌发酵方法，其特征在于，所述培养的温度为20-30℃。