[发明专利]miRNA分子标志物及其在显微取精手术预判中的应用

说明书

本发明公开了一组miRNA分子标志物及其在显微取精手术预判中的应用。所述miRNA分子标志物包括miR‑34b‑3p、miR‑34c‑3p、miR‑3065‑3p和miR‑4446‑3p。通过本发明筛选得到的标志物及相关引物组成的试剂盒，可以实现对显微取精手术结果进行预判，避免对无精患者进行不必要的创伤性检测及手术，节省资源，提高效率，同时也可以给手术医生重要的术前参考，提高手术成功率，并且完全没有创伤性，操作及其简单方便。

技术领域

本发明属于医学检验技术领域，具体涉及一组miRNA分子标志物及其在显微取精手术预判中的应用。

背景技术

不孕不育约占育龄人口15％，其中男性因素占50％，无精子症占10％。目前解决无精症患者生育问题的唯一手段就是显微取精手术，但是手术取精成功率与睾丸内是否有生精密切相关，而如何判断睾丸内部生精的状态目前唯一手段就是睾丸穿刺活检，然而这一方法一则是有创检验，对身体有一定伤害性，二则由于睾丸内部有局灶生精的特点，穿刺活检获得的部位无法代表整个睾丸。

为了提高显微取精手术的成功率，同时减少不必要的手术与穿刺，需要建立无创分子检验的方法，解决目前临床上对于显微取精手术结局无法进行预判的问题。

发明内容

本发明为了解决目前临床上对于显微取精手术结局无法进行预判的技术问题，提出了一组miRNA分子标志物，通过将该组miRNA分子标志物用于设计试剂盒，并建立模型方程，可以得到显微取精手术成功率预判概率，从而提高显微取精的手术成功率，并减少不必要的手术和穿刺创伤。

一组用于判断显微取精手术成功率的miRNA分子标志物，该标志物包括miR-34b-3p、miR-34c-3p、miR-3065-3p和miR-4446-3p。

上述miRNA分子标志物在制备用于判断显微取精手术成功率试剂盒中的应用。

用于检测上述miRNA分子标志物的引物对，具体如下：

对miR-34b-3p来说，上游引物序列如SEQ ID NO.9所示，下游引物为通用引物，序列如SEQ ID NO.13所示；

对miR-34c-3p来说，上游引物序列如SEQ ID NO.10所示，下游引物为通用引物，序列如SEQ ID NO.13所示；

对miR-3065-3p来说，上游引物序列如SEQ ID NO.11所示，下游引物为通用引物，序列如SEQ ID NO.13所示；

对miR-4446-3p来说，上游引物序列如SEQ ID NO.12所示，下游引物为通用引物，序列如SEQ ID NO.13所示。

上述引物对在制备用于判断显微取精手术成功率试剂盒中的应用。

一种用于判断显微取精手术成功率的试剂盒，包含上述引物对。

进一步地，还包括PCR技术常用的试剂和免疫组化技术常用的试剂。

有益效果：通过本发明筛选得到的标志物及相关引物组成的试剂盒，可以实现对显微取精手术结果进行预判，避免对无精患者进行不必要的创伤性检测及手术，节省资源，提高效率，同时也可以给手术医生重要的术前参考，提高手术成功率，并且完全没有创伤性，操作及其简单方便。

附图说明

图1为实施例2中40个样本的qPCR结果。

图2为实施例2中四种miRNA的相互关联性结果。

图3为实施例2中四种miRNA表达水平在预测生精功能中准确性的ROC曲线分析。

具体实施方式