[发明专利]一种米诺膦酸中二聚体的分离测定方法

说明书

本发明实施例公开了一种米诺膦酸中二聚体的分离测定方法，属于药物分析技术领域。所述方法包括以下步骤：1)向米诺膦酸样品中加入体积比为70～98：2～30的缓冲盐溶液与有机相的混合物，得到浓度为0.05～1.0mg/ml的米诺膦酸样品溶液，其中，所述缓冲盐溶液中含有浓度为0.1～50mmol/L的阴离子对试剂；2)以所述体积比70～98：2～30的缓冲盐溶液与有机相的混合物为流动相，将所述米诺膦酸样品溶液注入高效液相色谱仪中进行检测。该分离测定方法可以有效抑制二聚体的降解，实现定性以及定量的测定米诺膦酸中所含的二聚体，从而有效的控制米诺膦酸的质量，更有效的对米诺膦酸产品实现质量监控。

技术领域

本发明实施例涉及药物分析技术领域，具体涉及一种米诺膦酸中二聚体的分离测定方法。

背景技术

米诺膦酸是一种膦酸盐类骨质疏松症治疗药物，属于第三代双膦酸盐类药物，其作用机制是通过抑制破骨细胞内的焦磷酸法尼酯合成酶，抑制破骨细胞的骨吸收功能，进而使骨代谢循环减退。2009年4月首次在日本批准上市，用于预防和治疗骨质疏松症。

米诺膦酸化学名为[1-羟基-2-(咪唑[1,2-a]吡啶-3-基)亚乙基]-1,1-双膦酸一水合物，分子式C₉H₁₂N₂O₇P₂·H₂O。结构式为：

在米诺膦酸合成过程中，容易产生二聚体，结构式分别为式(Ⅰ)和式(Ⅱ)。

二聚体作为米诺膦酸的杂质降低了米诺膦酸产品的纯度，甚至可能会影响米诺膦酸的安全性和有效性，因而对二聚体含量的控制具有重要的意义。现有技术中，膦酸盐类药物的分析方法主要有紫外-可见分光光度法、高效液相色谱(HPLC)法、酶分析法、毛细管电泳法等。由于二聚体在水溶液中易发生水解反应而降解生成米诺膦酸，导致检测结果不能真实反映米诺膦酸样品的质量。

发明内容

为此，本发明实施例提供一种米诺膦酸中二聚体的分离测定方法，该分离测定方法可以有效抑制二聚体的降解，实现定性以及定量的测定米诺膦酸中所含的二聚体，从而有效的控制米诺膦酸的质量，更有效的对米诺膦酸产品实现质量监控。

为了实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：

一种米诺膦酸中二聚体的分离测定方法，所述方法包括以下步骤：

1)向米诺膦酸样品中加入体积比为70～98：2～30的缓冲盐溶液与有机相的混合物，得到浓度为0.05～1.0mg/ml的米诺膦酸样品溶液，其中，所述缓冲盐溶液中含有浓度为0.1～50mmol/L的阴离子对试剂；

2)以所述体积比70～98：2～30的缓冲盐溶液与有机相的混合物为流动相，将所述米诺膦酸样品溶液注入高效液相色谱仪中进行检测。

进一步地，所述阴离子对试剂包括四丁基溴化铵、四丁基氢氧化铵或四丁基氯化铵，作为优选，所述阴离子对试剂为四丁基溴化铵。

进一步地，所述缓冲盐包括十水焦磷酸钠或焦磷酸二氢二钠，作为优选，所述缓冲盐为十水焦磷酸钠；所述缓冲盐的浓度为1～100mmol/L，作为优选，浓度为20～50mmol/L；用磷酸调节使缓冲溶液的pH值为7.0～10.0，作为优选，pH值为7.0-9.0。

进一步地，所述有机相包括甲醇、乙腈、丙醇、异丙醇、四氢呋喃中的任意一种或多种的混合。作为优选，所述有机相包括甲醇和乙腈。更优选地，所述有机相为甲醇。