[发明专利]一种反向吸附提取生物产品的方法

权利要求书

1.一种反向吸附提取生物产品的方法，其特征在于：生物转化液体的制备：刺盘孢菌在30L发酵培养基中培养18h，加入无菌处理的固体去氢表雄酮80g，通气流量1.8Nm³/h，温度29℃，生物转化30h左右，TLC检测，转化完毕即结束培养，得生物转化液；

HPLC检测生物转化液，去氢表雄酮未检出，7-羟基去氢表雄酮未检出，双羟基普拉睾酮2.21mg/ml；将该上述生物转化液加入60L去离子水稀释，而后用胶体磨进行第一次破碎，之后再用高压均质机进行第二次破碎，其中均质压力为60MP，使双羟基普拉睾酮产品从菌丝体中充分释放出来，得待检测的生物产品液体；

反向吸附提取生物产品的方法，包括如下步骤：

步骤1）：取待检测的生物产品液体4000ml，100目滤网过滤，用液碱调节PH至7.15；

步骤2）：采用规格为θ22×400的树脂柱，在树脂柱内底部固定40目不锈钢滤网，而后在不锈钢滤网上方装入70ml非极性大孔吸附树脂，在非极性大孔吸附树脂上部预留60mm高度的空间，然后固定另一个40目不锈钢滤网；该步骤中用橡胶塞和橡胶管将上述两个同样树脂柱串联，将上部树脂柱上口用带有排液胶管的橡胶塞密封，将下部树脂柱下口安装1.5m左右长度的乳胶管作为上柱液入口；

步骤3）：将步骤1）中经过滤处理的生物产品液体利用步骤2）中处理好的树脂柱进行反向上柱吸附，上柱流速350ml/h；收集过柱液，过滤液进污水处理厂处理；

步骤4）：树脂吸附量达到饱和吸附量的60%-70%，上柱完毕；将两个串联的树脂柱分离，上部的树脂柱直接用于下一批的一级上样柱，下部树脂柱用去离子水反向冲洗，流速400ml/h, 冲洗0.5h后流出液澄清，冲洗结束；

步骤5）：用丙酮正向解吸，流速70ml/h，开始解吸液35ml弃去，收集之后解吸液300ml，树脂柱用去离子水200ml正向冲洗再生；解吸液回收丙酮，蒸干得固体，收集固体用60ml 4℃正庚烷搅拌洗涤，过滤，干燥，得产品2.78g，双羟基普拉睾酮含量为99.3%。