[发明专利]一种检测头皮马拉色菌的方法

说明书

本发明提供了一种检测头皮马拉色菌的方法，属于微生物检测技术领域，所述方法包括以下步骤：1)在头皮定点处用透明胶带粘取头皮屑样本，将粘有头皮屑样本的透明胶带粘贴在镂空载片上；2)采用KOH龙胆紫溶液对头皮屑样本进行染色，清洗残留染液，镜检。本发明的方法能够直观的反映皮损的自然状态，判断单位面积的相对菌量。本发明将粘取皮屑样本的透明胶带粘贴在镂空载片上，便于染色和镜检，并且胶带透明度高、表面平整、镜检折光率好，便于镜检时移动观察及相关视野的查找。本发明能有效、简便、快捷的检测出头皮马拉色菌。

技术领域

本发明涉及微生物检测技术领域，尤其涉及一种检测头皮马拉色菌的方法。

背景技术

马拉色菌为嗜脂性担子菌纲酵母菌，该菌属于人类及温血动物皮肤上的常驻菌。马拉色菌包括糠秕马拉色菌(M.furfur)、厚皮马拉色菌(M.pachydermatis)、合轴马拉色菌(M.sympodialis)、球形马拉色菌(M.globosa)、钝型马拉色菌(M.obtuse)、限制性马拉色菌(M.restricta)和斯洛菲马拉色菌(M.slooffiae)等。目前，对马拉色菌的生物学特性，致病因素，以及相关疾病与治疗研究越来越广泛深入。

日常生活中，困扰我们的头皮屑，与马拉色菌是密切相关的。而在马拉色菌种属当中，糠秕马拉色菌成为了头皮马拉色菌中的优势菌群。有研究表明，用抗头皮屑制剂治疗头皮屑，头皮屑数量减少的同时，糠秕马拉色菌的数量也减少了。这样一个现象推测糠秕马拉色菌与头皮屑的发病有关。在46％的正常人，74％的头皮屑过多者，83％的脂溢性皮炎患者中均能检测到糠秕马拉色菌。还有一组数据，脂溢性皮炎患者中，糠秕马拉色菌数量为900000个/cm²，占全部微生物总数的74％；非脂溢性皮炎中，糠秕马拉色菌数量为500000个/cm²，占全部微生物总数的46％；前者差不多是后者数量的2倍，表明糠秕马拉色菌与头皮屑有关。

在马拉色菌样品采集上，目前采用的方法包括钝手术刀刮取法、擦洗法、牙刷刷取法和挤压法；上述方法中较为简便的是牙刷刷取法，但是这一方法会改变标本中菌与皮肤细胞的相对位置，不能直观的反映皮损的自然状态，无法判断单位面积的相对菌量。在样品染色上，目前采用的方法包括KOH法、DMSO-KOH法、乳酸酚棉蓝染色、革兰氏染色法和派克墨水染色，但是上述方法适用于临床医学或是基础科学研究，不适用于日常生活中快速、简便染色。在样品镜检上，目前通常是将样品置于普通镜检玻璃载片上进行染色和镜检，但是玻璃载片易碎且样品不能固定，不便于染色和镜检。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测头皮马拉色菌的方法，该方法能够检测单位面积头皮马拉色菌的相对菌量，且检测方法更加简便。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种检测头皮马拉色菌的方法，包括以下步骤：

1)在头皮定点处用透明胶带粘取头皮屑样本，将粘有头皮屑样本的透明胶带粘贴在镂空载片上；

2)采用KOH龙胆紫溶液对头皮屑样本进行浸泡染色，清洗残留染液，镜检。

优选的，步骤1)中所述头皮定点选自前额发际线、头顶、脑后颈部发际线、左耳际正上方2cm和右耳际正上方2cm中的一处或几处。

优选的，步骤1)中所述头皮定点的采样面积为2～2.5cm²。

优选的，步骤1)中所述透明胶带包括透明聚酯薄膜胶带。

优选的，步骤1)中所述透明胶带的长度和宽度独立为1.5cm。

优选的，步骤1)中所述镂空载片的长度为7～8cm，宽度为2.2～2.8cm；所述镂空载片的镂空部分的长度和宽度独立为1.5cm。

优选的，步骤2)中所述KOH龙胆紫溶液中KOH的质量浓度为10％。