[发明专利]定量检测OC-STAMP基因表达水平的成套试剂及其应用

说明书

本发明公开了定量检测OC‑STAMP基因表达水平的成套试剂及其应用。所述成套试剂包括由引物OC‑FP和引物OC‑RP组成的引物对甲、探针甲、由引物ABL1‑F和引物ABL1‑R组成的引物对乙、探针乙、阳性对照和内参对照质粒。所述引物OC‑FP如序列1所示，所述引物OC‑RP如序列2所示，所述探针甲如序列3所示，所述引物ABL1‑F如序列4所示，所述引物ABL1‑R如序列5所示，所述探针乙如序列6所示。本发明提供的成套试剂可定量检测OC‑STAMP基因的表达水平，用于多发性骨髓瘤患者辅助诊断、病程进展和/或复发及缓解深度的监测，将在医学检测领域发挥重要的作用。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及定量检测OC-STAMP基因表达水平的成套试剂及其应用，特别涉及定量检测OC-STAMP基因表达水平的引物对和探针及其在多发性骨髓瘤诊断中的应用。

背景技术

多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)是起源于浆细胞的第二常见的血液恶性肿瘤，占全部血液肿瘤的10-15％。骨髓瘤细胞在骨髓中恶性增殖并分泌单克隆免疫球蛋白，将会导致器官和组织损伤。骨髓浸润会导致正常造血受到抑制从而出现贫血、感染和出血症状。骨质中的浸润会刺激破骨细胞增强其溶骨作用，会导致骨痛、骨缺损、高钙血症和病理性骨折。本病好发于老年人，平均发病年龄70岁左右，男女比例为(1.6-3):1。目前MM的治疗以药物治疗为主。在预后分层和疗效评判方面，往往依靠细胞遗传学指标和生化指标，缺乏特异性的分子生物学标记物。

OC-STAMP(osteoclast stimulatory trans-membrane protein)是在破骨细胞中发现的新基因，其在单核细胞分化为破骨细胞的过程中表达被上调。OC-STAMP的基因表达产物与DC-STAMP(Dendrocyte Expressed Seven Transmembrane Protein)蛋白家族有高度的相似性，在其羧基末端保守，它的主要作用是作为破骨细胞的融合和分化过程中的关键分子。近期的研究表明OC-STAMP基因在RANKL(receptor activator of nuclearfactor-κB ligand)的诱导下编码一个细胞膜锚定受体，并且在单核细胞融合形成破骨细胞的过程中与DC-STAMP相互作用。

发明内容

本发明的一个目的是提供用于多发性骨髓瘤辅助诊断的成套试剂。

本发明提供的用于多发性骨髓瘤辅助诊断的成套试剂包括引物对甲和探针甲；所述引物对甲由引物OC-FP和引物OC-RP组成；

所述引物对甲的靶序列含有特异DNA片段甲；所述特异DNA片段甲为序列表中序列7所示的DNA分子；

所述探针甲为20-35个核苷酸组成的单链DNA分子，与所述特异DNA片段甲中的部分区段相同或互补。

上述成套试剂中，所述引物OC-FP为序列表中序列1所示的单链DNA分子；

所述引物OC-RP为序列表中序列2所示的单链DNA分子；

所述探针甲为序列表中序列3所示的单链DNA分子。

上述成套试剂还包括引物对乙和探针乙；所述引物对乙由引物ABL1-F和引物ABL1-R组成；

所述引物对乙的靶序列含有特异DNA片段乙；所述特异DNA片段乙为序列表中序列8所示的DNA分子；

所述探针乙为20-35个核苷酸组成的单链DNA分子，与所述特异DNA片段乙中的部分区段相同或互补。

上述成套试剂中，所述引物ABL1-F为序列表中序列4所示的单链DNA分子；

所述引物ABL1-R为序列表中序列5所示的单链DNA分子；

所述探针乙为序列表中序列6所示的单链DNA分子。