[发明专利]一种用于免疫层析检测试剂盒的快速分离红细胞的方法

权利要求书

1.一种红细胞分离剂，其特征在于，包括以下组分：羧基聚苯乙烯微球、活性基团树枝状聚合物和抗人RBC抗体；其中所述活性基团树枝状聚合物为多聚赖氨酸、树枝状聚酰胺胺或聚丙烯亚胺正三十二烷胺；所述羧基聚苯乙烯微球的质量浓度为1.0-5.0%，活性基团树枝状聚合物在反应体系中的浓度为0.05%-1.0%，抗人RBC抗体在反应体系中的浓度为0.05-5.0mg/mL。

2.一种用于免疫层析检测试剂盒的快速分离红细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：制备活性基团树枝状聚合物修饰的聚苯乙烯微球；

S2：制备活性基团树枝状聚合物修饰的聚苯乙烯微球-抗人RBC抗体红细胞分离剂；

S3：将步骤S2制备的所述红细胞分离剂添加至免疫层析检测试剂盒中的样本稀释液；或将所述红细胞分离剂涂覆在所述试剂盒的血液处理管内壁；

所述活性基团树枝状聚合物为多聚赖氨酸、树枝状聚酰胺胺或聚丙烯亚胺正三十二烷胺，反应体系中活性基团树枝状聚合物使用的反应浓度为0.05%-1.0%；

所述抗人RBC抗体的在反应体系中的浓度为0.05-5.0 mg/mL；

所述聚苯乙烯微球为羧基聚苯乙烯微球，其质量浓度为1.0-5.0%。

3.如权利要求2所述的快速分离红细胞的方法，其特征在于，所述步骤S1制备活性基团树枝状聚合物修饰的聚苯乙烯微球的方法包括以下步骤：

S1：将羧基聚苯乙烯微球加入到微球稀释液中，超声分散处理，得到均匀分散的微球悬浊液；

S2：对羧基聚苯乙烯微球进行活化处理，活化结束后离心去除上清液，得到活化的羧基聚苯乙烯微球；

S3：向活化后的羧基聚苯乙烯微球悬浊液中，滴加含有活性基团树枝状聚合物溶液，搅拌反应结束后，离心去掉上清液，得到活性基团树枝状聚合物修饰的聚苯乙烯微球。

4.如权利要求3所述的快速分离红细胞的方法，其特征在于，所述活化剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC）和N-羟基丁二酰亚胺（NHS），其中EDC使用的反应浓度为100-800 mM，NHS使用的反应浓度为100-800 mM。

5.如权利要求3所述的快速分离红细胞的方法，其特征在于，所述步骤S2制备活性基团树枝状聚合物修饰的聚苯乙烯微球-抗人RBC抗体红细胞分离剂方法包括以下步骤：

S1：将活性基团树枝状聚合物修饰的聚苯乙烯微球溶液，加入到微球稀释液中，超声分散，加入活化剂进行活化处理；

S2：活化后的活性基团树枝状聚合物修饰的聚苯乙烯微球，经离心去掉上清液，将得到的活化微球重新分散到标记稀释液中；

S3：将抗人RBC抗体加入到上述活化的活性基团树枝状聚合物修饰的聚苯乙烯微球溶液中，37℃反应1~6小时，反应结束后离心去掉上清液，得到的活性基团树枝状聚合物修饰的聚苯乙烯微球-标记抗人RBC抗体复合物，即为红细胞分离剂。

6.如权利要求5所述的快速分离红细胞的方法，其特征在于，所述活化剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC）和N-羟基丁二酰亚胺（NHS），其中EDC使用的反应浓度为100-800 mM，NHS使用的反应浓度为100-800 mM。

7.如权利要求2所述的快速分离红细胞的方法，其特征在于，所述步骤S3中将红细胞分离剂添加至免疫层析检测试剂盒中的样本稀释液，所述红细胞分离剂的添加量为0.05-1%（V/V）；或将红细胞分离剂涂覆在免疫层析检测试剂盒的血液处理管内壁，所述红细胞分离剂的用量为2-20微升。