[发明专利]Gd:CuS@Flu@RGD纳米制剂的合成方法

说明书

本发明涉及一种Gd:CuS@Flu@RGD纳米制剂的合成方法。包括1)CuCl₂·2H₂O水溶液的制备；2)GdCl₃·6H₂O水溶液的制备；3)一锅法合成Gd:CuS@Flu纳米颗粒；4)利用两步复乳液法合成Gd:CuS@Flu@RGD纳米颗粒。RGD靶向分子和PLGA‑Hyd‑PEG载体帮助高效靶向肿瘤病灶；流感病毒利用强烈免疫激活功能来活化全身免疫系统，引起免疫应答；AIE探针和Gd:CuS的可视化引导实现肿瘤抗原的光控释放，进一步激活免疫细胞的杀伤效率,并诱使机体产生免疫记忆功能,达到高效、彻底治疗肿瘤的目的。

技术领域

本发明涉及一种通过蛋白介导仿生模拟策略成功制备出的Gd:CuS@Flu@RGD纳米诊疗剂，具体涉及一种Gd:CuS@Flu@RGD肿瘤联合治疗纳米制剂的合成方法。

背景技术

目前，肿瘤是世界上对人类威胁最大的疾病之一。免疫治疗通过激活人体免疫系统，依靠自身免疫机能杀灭癌细胞和肿瘤组织，从而达到治疗癌症的作用。因此，免疫治疗是治疗肿瘤最有效的方法之一。

流感病毒作为异物在体内可以激发全身免疫系统产生细胞因子风暴(如干扰素、肿瘤坏死因子和各种白细胞介素等)，并使在抗肿瘤治疗过程中具有重要作用的树突状细胞(DC细胞，提呈肿瘤抗原)，巨噬细胞(细胞，吞噬肿瘤细胞)和自然杀伤细胞(NK细胞，杀伤肿瘤细胞)等被大量激活，随后大幅提高T细胞的增值效率。这种基于流感病毒的复合纳米制剂可全身性激活机体免疫功能，给肿瘤造成全方位的杀伤和清除，相对于传统肿瘤治疗方法，该策略使肿瘤治疗更加高效。

为了使药物准确到达肿瘤部位，保证肿瘤部位的药物浓度，而且避免药物浓度过大所引起的不良反应，可以使用肿瘤靶向载体来达到达到精准治疗的目的。目前国内外研究的载体系统主要有：(1)大分子载体系统(2)磁性药物制剂(3)多重靶向制剂(4)微粒载体系统。其中PLGA-Hyd-PEG载体可以高效靶向肿瘤病灶。

RGD靶向分子是一类含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸的短肽，可介导肿瘤的靶向治疗。抗肿瘤药物及其递送系统经过RGD靶向分子的修饰可増加药物的肿瘤主动靶向特性，达到更有效、精确和安全的治疗。

光热治疗(photothermal therapy，PTT)是一种新型肿瘤治疗方法，在外部近红外光的照射下，肿瘤部位的光热剂吸收近红外光并将其转化为热，使肿瘤部位温度迅速升高到48℃以上，几分钟内可杀死癌细胞。光热治疗过程产生的副作用较小，全身系统毒性低，不会对正常组织造成损伤，具有很大的临床应用潜力。如果将光热治疗与肿瘤免疫治疗相结合，将极大地增强肿瘤治疗的效果，使肿瘤治疗更加彻底。

制备出的该药物有有以下几大优点：1)RGD靶向分子和PLGA-Hyd-PEG载体可以帮助高效靶向肿瘤病灶；2)流感病毒可以利用强烈免疫激活功能来活化全身免疫系统，引起免疫应答；3)AIE探针和Gd:CuS的可视化引导实现了肿瘤抗原的光控释放，进一步激活了免疫细胞的杀伤效率,并诱使机体产生免疫记忆功能,达到高效、彻底治疗肿瘤的目的。

发明内容

本发明涉及一种策略仿生模拟成功合成Gd:CuS@Flu@RGD纳米制剂的合成方法。

本发明的技术方案是Gd:CuS@Flu@RGD纳米制剂的合成方法，包括如下步骤：

1)二水合氯化铜(CuCl₂·2H₂O)粉末加入超纯水后超声溶解，得到浓度为0.005-0.02M的CuCl₂·2H₂O水溶液；

2)氯化钆六水合物粉末(GdCl₃·6H₂O)加入超纯水后超声溶解，得到浓度为0.025-0.1M的GdCl₃·6H₂O水溶液；