[发明专利]一种复合缓冲体系在制备α-淀粉酶测定试剂盒中的应用有效
申请号: | 201911116972.6 | 申请日: | 2019-11-15 |
公开(公告)号: | CN110951824B | 公开(公告)日: | 2023-08-11 |
发明(设计)人: | 黄清媚;崔海林;曾晓君;于云飞 | 申请(专利权)人: | 中山市创艺生化工程有限公司 |
主分类号: | C12Q1/40 | 分类号: | C12Q1/40 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 肖云 |
地址: | 528400 广东省中*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 复合 缓冲 体系 制备 淀粉酶 测定 试剂盒 中的 应用 | ||
本发明公开了一种复合缓冲体系在制备α‑淀粉酶测定试剂盒中的应用,所述复合缓冲体系为含有MES、ACES和PIPES的混合缓冲液。本发明的α‑淀粉酶测定试剂盒稳定性良好,同时确保了试剂盒检测结果的准确性。含有本发明方案复合缓冲体系的α‑淀粉酶测定试剂盒在(2‑8)℃可稳定保存21个月以上,该试剂盒成本低廉,配制简单,值得进一步广泛推广。
技术领域
本发明涉及体外诊断技术领域,具体涉及一种复合缓冲体系在制备α-淀粉酶测定试剂盒中的应用。
背景技术
血清淀粉酶即血淀粉酶,是淀粉酶的一种,主要由唾液腺和胰腺分泌,另外近端十二指肠、肺、子宫、泌乳期的乳腺等器官也有少量分泌。其功能主要是能分解多糖,如淀粉和糖原。血清淀粉酶测定是急性胰腺炎最常用的诊断指标,目前国内各临床实验室用于血清淀粉酶测定的方法有200多种,反应原理不一,导致血清淀粉酶测定难以标准化。为了测定结果统一最有效的手段是建立参考系统,国际临床化学和检验医学联合会(Internationalfederation of clinical chemistry and laboratory medicine,IFCC)于2006年发表的一级参考测量程序(37℃)中表明试剂原料对测量结果存在影响。α-淀粉酶(α-Amylase,AMY)是一种常用的血清淀粉酶测定原料,参考方法中规定的α-葡萄糖苷酶和4,6-亚乙基-4-硝基苯-α-D麦芽七糖(Ethylidene-4-nitrophenyl-α-D-maltoheptaoside4,6-ethylidene(G7)-p-nitrophenyl(G1)-α,D-maltoheptaoside,pNP-G7或EPS)作为关键底物。目前,市场上使用较多的AMY试剂盒均是基于pNP-G7检测的试剂盒,然而该类试剂盒稳定性欠佳,且受样本中蛋白浓度、离子强度及激活剂等影响。因此,研究一种性能稳定的α-淀粉酶测定试剂盒,将具有良好的市场价值。
缓冲溶液通常是由弱酸及其弱酸盐或弱碱及其弱碱盐组成的一对共轭体,在生化研究工作中主要用于维持体系的酸碱度和离子强度,以保证反应体系处于动态平衡。不同的反应体系需要选择不同的缓冲体系,普通的缓冲溶液都是利用单一的弱酸-共轭碱或弱碱-共轭酸之间的酸碱平衡来达到缓冲作用。然而,对于某些反应体系,单一酸和碱组成的缓冲体系难以满足其要求。Pridraux于1916年提出了广泛缓冲体系,该体系的共存离子基本不变,但使用pH范围扩宽(2-12之间),这类缓冲液改进后被命名为Britton-Robinson广泛缓冲液。除维持体系的酸碱度以外,缓冲溶液离子强度对生化反应试剂的稳定性也有很大的作用,因此,控制酸碱度和离子强度对于维持生化反应试剂的稳定性具有重要意义。
基于此,开发一种复合缓冲体系有望解决现有技术中存在的α-淀粉酶测定试剂盒稳定性不佳缺陷。
发明内容
本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此,本发明提出一种复合缓冲体系在制备α-淀粉酶测定试剂盒中的应用,该复合缓冲体系能够提升α-淀粉酶测定试剂盒的稳定性。
本发明还提出一种含有上述复合缓冲体系的α-淀粉酶测定试剂盒。
本发明还提出利用上述试剂盒进行α-淀粉酶检测的方法。
根据本发明的第一方面实施例的复合缓冲体系在制备α-淀粉酶测定试剂盒中的应用,所述复合缓冲体系为含有2-(N-吗啡啉)乙磺酸(2-Morpholinoethanesulfonic Acidmonohydrate,MES)、N-(乙酰氨基)-2-氨基乙烷磺酸(N-(2-Acetamido)-2-Aminoethanesulfonic acid,ACES)和哌嗪-1,4-二乙磺酸(Piperazine-1,4-bisethanesulfonic acid,PIPES)的混合缓冲液。
根据本发明的一些实施例,所述复合缓冲体系中,MES的质量百分含量为(1~2)%,ACES的质量百分含量为(0.5~1)%,PIPES的质量百分含量为(0.5~1)%。
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