[发明专利]一种碳酸盐矿化菌矿化结晶固化重金属的方法

权利要求书

1.一种碳酸盐矿化菌矿化结晶固化重金属的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）样品采集：从金尾矿区采集土样，将所述土样在4℃条件下备用；

（2）配制培养基：富集培养基，并筛选培养基；

（3）矿化菌的培养：在所述土样中筛选出一株碳酸盐矿化菌，接种到UNB培养基中，置于30-40℃、150-180r/min下培养20-30 h，所得菌液在4℃条件下备用；

（4）矿化能力鉴定：将步骤（3）选出的一株碳酸盐矿化菌接种到含尿素、钙离子的液体培养基中，将其置于30-40℃、150-180r/min恒温振荡器中培养20-30 h，观察是否有沉淀产生，若有，则进行步骤（5）；若没有沉淀产生，则重新选择另一株碳酸盐矿化菌，重复步骤（3）-（4）；

（5）添加成核剂加速固化：将在UNB培养基中培养的碳酸盐矿化菌按0.1%的比例接种至含 CaCl₂和Pb的UNB培养基中，并在其中加入1%-10%的成核剂，将其置于30-40℃、150-180r/min恒温振荡器中培养4-8 d；所述成核剂为钠盐。

2.根据权利要求1所述的一种碳酸盐矿化菌矿化结晶固化重金属的方法，其特征在于：还包括步骤（6）验证固话效果：在步骤（5）中的培养期间，在不同时间下通过偏光显微镜对添加不同成核剂的培养基进行测定，确定结晶情况；培养结束后，进行过滤操作，其沉淀置于40-60℃烘箱烘至恒重，称量其沉淀质量。

3.根据权利要求1所述的一种碳酸盐矿化菌矿化结晶固化重金属的方法，其特征在于：所述富集培养基为液体培养基包括：蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L、氯化钠5g/L，pH值为7.4。

4.根据权利要求1所述的一种碳酸盐矿化菌矿化结晶固化重金属的方法，其特征在于：所述的培养基在接种之前进行灭菌，灭菌条件为121℃，时间为20min。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的一种碳酸盐矿化菌矿化结晶固化重金属的方法，其特征在于：所述成核剂对CaCO₃的形成有促进作用。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的一种碳酸盐矿化菌矿化结晶固化重金属的方法，其特征在于：所述成核剂会能够改善微生物的活力，加快酶反应的能力。

7.根据权利要求1所述的一种碳酸盐矿化菌矿化结晶固化重金属的方法，其特征在于：所述步骤（1）中的土样获取后保存在无菌封闭袋中。

8.根据权利要求1所述的一种碳酸盐矿化菌矿化结晶固化重金属的方法，其特征在于：所述步骤（3）中所得菌液在冰箱中保存，保存温度为4℃。

9.根据权利要求1所述的一种碳酸盐矿化菌矿化结晶固化重金属的方法，其特征在于：所述步骤（2）中，富集培养基的步骤具体为：使用液体培养基，包括：蛋白胨10 g/L、牛肉膏3g/L、氯化钠5g/L，pH值为7.4；所述筛选培养基的步骤具体为：使用固体培养基，包括琼脂15g/L、葡萄糖1g/L、尿素20g/L、氯化钠5g/L、磷酸二氢钾2 g/L、蛋白胨1g/L、1g蛋白胨、酚红0.012g/L，pH值为7.2。

10.根据权利要求1所述的一种碳酸盐矿化菌矿化结晶固化重金属的方法，其特征在于：步骤（3）中所筛选出的碳酸盐矿化菌选自于巴氏芽孢杆菌、科氏葡萄球菌、嗜麦芽窄食单胞菌、解硫胺素芽孢杆菌、纺锤体赖氨酸芽孢杆菌中的一种。