[发明专利]诺如病毒GI和GII型量子点联检试纸条及其制备方法和应用有效
申请号: | 201911124854.X | 申请日: | 2019-11-18 |
公开(公告)号: | CN110954695B | 公开(公告)日: | 2021-05-11 |
发明(设计)人: | 潘庆军;吴平;张莉芳;蒋娜;王思捷;李新新;吴晗 | 申请(专利权)人: | 广东医科大学附属医院 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/569;G01N33/531;G01N33/558 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 郝传鑫;王兰兰 |
地址: | 524001 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 病毒 gi gii 量子 联检 试纸 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种诺如病毒GI和GII型量子点联检试纸条,其特征在于,包括底板,以及在所述底板上从左往右依次搭接的样本垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,所述结合垫上包被有量子点标记的诺如病毒GI型检测抗体和量子点标记的诺如病毒GII型检测抗体;
所述量子点标记的诺如病毒GI型检测抗体和量子点标记的诺如病毒GII型检测抗体采用量子点复溶液稀释后再按一定比例混合后包被到结合垫上;
所述量子点复溶液为含有土冉糖1-10wt%、吐温-40 0.02-0.1wt%、甘氨酸0.2-1wt%和ProClin950 0.01-0.1v%的磷酸盐缓冲液;所述样本垫经样本垫处理液处理后,烘干制得;所述样本垫处理液为含聚乙烯吡咯烷酮0.1-1wt%、聚乙二醇-600 0.5-3wt%、Triton-100 0.5-3wt%和乙醇胺0.5-3wt%的磷酸盐缓冲液。
2.如权利要求1所述的诺如病毒GI和GII型量子点联检试纸条,其特征在于,所述诺如病毒GI型检测抗体为小鼠、兔或羊诺如病毒GI型单克隆抗体;所述诺如病毒GII型检测抗体为小鼠、兔或羊诺如病毒GII型单克隆抗体。
3.如权利要求1所述的诺如病毒GI和GII型量子点联检试纸条,其特征在于,所述量子点为羧基水溶性量子点,粒径12nm-18nm,最大发射波长在600-630nm,激发波长450nm。
4.如权利要求1所述的诺如病毒GI和GII型量子点联检试纸条,其特征在于,所述硝酸纤维素膜设置有检测线1、检测线2和质控线,所述检测线1上包被有小鼠、兔或羊诺如病毒GI型捕获单克隆抗体;所述检测线2上包被有小鼠、兔或羊诺如病毒GII型捕获单克隆抗体;所述质控线上包被有羊抗鼠多克隆抗体或兔抗鼠多克隆抗体。
5.一种制备如权利要求1所述的诺如病毒GI和GII型量子点联检试纸条的方法,其特征在于,包括以下步骤:
将所述样本垫采用样本垫处理液处理,烘干;
将诺如病毒GI型检测抗体和诺如病毒GII型检测抗体以共价偶联的方式偶联到量子点上;将上述量子点采用量子点复溶液稀释后包被到结合垫上;
使用抗体包被缓冲液将诺如病毒GI型捕获单克隆抗体、诺如病毒GII型捕获单克隆抗体以及羊抗鼠多克隆抗体或兔抗鼠多克隆抗体稀释后分别包被到硝酸纤维素膜的检测线1、检测线2和质控线上;
在所述底板上依次从左往右相互交错地贴上样本垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,即得到量子点免疫层析试纸条。
6.如权利要求5所述的制备诺如病毒GI和GII型量子点联检试纸条的方法,其特征在于,所述将诺如病毒GI型检测抗体和诺如病毒GII型检测抗体以共价偶联的方式偶联到量子点上的具体过程为:
使用第一缓冲液重悬量子点,加入活化剂活化量子点,室温避光活化反应;
纯化得到的量子点,使用第一缓冲液重悬,再加入诺如病毒GI型检测抗体,混匀;
加入封闭液封闭,封闭后再次纯化,使用第二缓冲液重悬量子点,得到量子点标记的诺如病毒GI型检测抗体,备用;
按照上述同样的方法将诺如病毒GII型检测抗体标记在量子点上。
7.如权利要求1-4任一项所述的试纸条在制备检测或辅助检测诺如病毒GI型和GII型抗原试剂盒中的应用。
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