[发明专利]一种天然本草提取物对长期吸烟危害的减害作用的测试方法

权利要求书

1.一种天然本草提取物对长期吸烟危害的减害作用的测试方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)利用受试烟草建立大鼠主流烟气暴露模型：

a.对实验动物称重，根据实验动物的体重进行随机分组，包括空白对照组、普通卷烟模型组和模型组，所述模型组在普通卷烟模型组的基础上，以1％的质量比添加本草提取物于卷烟中；

b.烟气暴露方法：将实验动物置于主流烟气暴露腔体内，主流烟气暴露时间为60min/天，共暴露180天，主流烟气暴露腔体内的烟气浓度为990-1210mg/m³，空白对照组的实验动物不进行实验干预，普通卷烟模型组的实验动物采用不含有天然本草提取物的普通卷烟进行烟气暴露，模型组的实验动物采用添加了本草提取物的卷烟进行烟气暴露；

(2)临床症状观察：每天观察一次实验动物的外观、体征、行为活动、腺体分泌、呼吸和粪便性状；

(3)测定体重：每周测定一次实验动物的体重；

(4)测定饲料消耗量：每周测定一次饲料消耗量，饲料消耗量的计算公式为：

(5)临床病理学检查：

烟气暴露180天后，从空白对照组、普通卷烟模型组和模型组各取部分实验动物进行心肺功能检查，同时取血分别进行血液学指标检测、凝血检测、血清生化指标检测、血清抗氧化指标检测、免疫功能指标检测、基因组学检测，另取尿液进行尿常规检查，取血前12～16小时对动物进行禁食处理；

(6)组织病理学检查：对实验动物均进行组织器官的大体观察，并对脑、心脏、肝脏、脾脏、左侧肺、肾脏、肾上腺、胸腺、睾丸和附睾进行称重，计算脏器系数和脏脑比值，脏器系数的计算公式为：

脏脑比值的计算公式为：

随后用10％的中性福尔马林缓冲液固定心、主动脉、肝、脾、肺、气管、肾、脑、肾上腺、胸腺、睾丸、淋巴结和骨髓，并制备成组织病理切片，经HE染色后进行组织病理学分析；

(7)将空白对照组、普通卷烟模型组和模型组的实验动物的临床症状、体重变化、饲料消耗量、临床病理学检查结果和组织病理学检查结果进行对比。

2.根据权利要求1所述的天然本草提取物对长期吸烟危害的减害作用的测试方法，其特征在于，所述步骤(1)中的实验动物的随机分组方法为分段均衡随机分组法。

3.根据权利要求1所述的天然本草提取物对长期吸烟危害的减害作用的测试方法，其特征在于，所述步骤(5)中检测的免疫功能指标包括淋巴细胞亚群、血清TNF-α、IL-6、IL-1β、补体C3和溶菌酶。