[发明专利]固相肽合成方法及相关系统

权利要求书

1.用于向肽添加氨基酸残基的方法，其包括：

使包含氨基酸的第一流流动；

使包含氨基酸活化剂的第二流流动；

合并所述第一流和所述第二流以形成包含活化氨基酸的混合流体；以及

在合并所述第一流和所述第二流以形成所述混合流体之后约30秒内，使所述混合流体暴露于固定在固体支持物上的多个肽。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述氨基酸活化剂包括碱性液体、碳二亚胺和/或脲鎓活化剂。

3.根据权利要求1至2中任一项所述的方法，其包括加热氨基酸以使得所述氨基酸的温度提高至少约1℃，其中在使所述氨基酸暴露于固定肽之前且在30秒内进行所述加热步骤。

4.根据权利要求3所述的方法，其中在合并步骤之前、在合并步骤期间和/或在合并步骤之后进行所述加热步骤。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述固体支持物包含聚苯乙烯和/或聚乙二醇。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述固体支持物包含树脂，例如微孔聚苯乙烯树脂。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述固体支持物包含在填充柱和/或流化床内。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中在使所述混合流体暴露于所述固定肽之后，至少约99％的所述固定肽添加了氨基酸残基。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中在使所述混合流体暴露于所述固定肽之后，少于约1％的所述固定肽结合了所述氨基酸残基的多份拷贝。

10.根据权利要求8至9中任一项所述的方法，其中向所述固定肽添加氨基酸残基包括向所述固定肽添加单个氨基酸残基。

11.根据权利要求8至10中任一项所述的方法，其中向所述固定肽添加氨基酸残基包括向所述固定肽添加包含两个或更多个氨基酸残基的肽。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其包括加热包含氨基酸的所述第一流以使得所述氨基酸的温度提高至少约1℃，其中在使经加热的氨基酸暴露于所述多个固定肽之前且在约30秒内进行所述加热步骤。

13.用于向肽添加氨基酸残基的方法，其包括：

提供多个包含保护基团的肽，每个肽固定在固体支持物上；

进行第一氨基酸添加循环，其包括使氨基酸暴露于固定肽以使得向至少约99％的所述固定肽添加氨基酸残基；以及

进行第二氨基酸添加循环，其包括使氨基酸暴露于所述固定肽以使得向至少约99％的所述固定肽添加氨基酸残基；

其中：

所述第一氨基酸添加循环结束与所述第二氨基酸添加循环结束之间的总时间量为约10分钟或更短，并且所述保护基团包括芴基甲氧羰基保护基团，和/或

所述第一氨基酸添加循环结束与所述第二氨基酸添加循环结束之间的总时间量为约5分钟或更短。

14.用于向肽添加氨基酸残基的方法，其包括：

提供固定在固体支持物上的多个肽；以及

使活化氨基酸暴露于所述固定肽，以使得至少一部分的所述活化氨基酸与所述固定肽结合以形成新结合的氨基酸残基；

其中至少约99％的所述固定肽在约1分钟或更短的时间内添加了氨基酸残基。

15.用于向肽添加氨基酸残基的方法，其包括：

提供多个包含保护基团的肽，每个肽固定在固体支持物上；

使去保护试剂暴露于固定肽以从至少一部分的所述固定肽中除去保护基团；

除去至少一部分的所述去保护试剂；

使活化氨基酸暴露于所述固定肽以使得至少一部分的所述活化氨基酸与所述固定肽结合以形成新结合的氨基酸残基；以及

除去至少一部分不与所述固定肽结合的活化氨基酸；

其中在氨基酸暴露步骤期间至少约99％的所述固定肽添加了氨基酸残基；并且

其中：

进行所有的去保护试剂暴露步骤、去保护试剂除去步骤、活化氨基酸暴露步骤和活化氨基酸除去步骤的组合所花费的总时间量为约10分钟或更短，并且所述保护基团包括芴基甲氧羰基保护基团，和/或

进行所有的去保护试剂暴露步骤、去保护试剂除去步骤、活化氨基酸暴露步骤和活化氨基酸除去步骤的组合所花费的总时间量为约5分钟或更短。