[发明专利]过氧麦角甾醇和EGFR靶点抗体组合物及其在头颈部鳞状细胞癌上应用

权利要求书

1.一种EGFR靶点抗体的组合物，其特征在于：组合物为过氧麦角甾醇和EGFR为靶点的单抗和/或双特异性抗体及稳定剂。

2.根据权利要求1所述EGFR靶点抗体的组合物，其特征在于：其中所述稳定剂选用枸橼酸。

3.根据权利要求1所述EGFR靶点抗体的组合物，其特征在于：所述组合物的制备方法包括以下步骤：

(1)过氧麦角甾醇的获得；

(2)步骤1中的过氧麦角甾醇制备成10-200mg/ml溶液，将过氧麦角甾醇溶液与以EGFR为靶点的单抗和/或双特异性抗体混合获得组合物。

4.根据权利要求1-3任一所述的EGFR靶点抗体的组合物，其特征在于：组合物中以EGFR为靶点的单抗和/或双特异性抗体含量为10-1000μg/ml；稳定剂百分比含量0.01-0.05％。

5.根据权利要求1-3任一所述的EGFR靶点抗体的组合物，其特征在于：抗体可以为：西妥昔单抗、ABX-EGF及EMD72000，以及其他的以EGFR为靶点的单抗和/或双特异性抗体一种或多种。

6.根据权利要求1-3任一所述的EGFR靶点抗体的组合物，其特征在于：上述过氧麦角甾醇的制备方法如下：

取新鲜、无毁坏的圆孢蘑菇子实体，切片后用90-95％乙醇浸泡一周圆孢蘑菇子实体，过滤得滤液，减压回收溶剂，滤渣加入90-95％乙醇超声提取3-5次，每次提取1-5h，减压浓缩得90-95％乙醇浸膏；用60-65％乙醇同法操作，减压浓缩得60-65％乙醇浸膏；醇提取后的圆孢蘑菇滤渣，加入蒸馏水超声提取三次，每次提取1-3h，减压浓缩得水提浸膏；

将两部分醇提浸膏合并，将合并后的浸膏捏溶分散于纯水中，在分液漏斗中加入石油醚，再将浸膏分散液加入分液漏斗中，萃取5次，萃取液合并浓缩，得石油醚部位。后再次向分液漏斗中加入乙酸乙酯，萃取6次，萃取液合并浓缩，得乙酸乙酯部位；之后再向分液漏斗中加入正丁醇，萃取5次，萃取液合并浓缩，得正丁醇部位；

将上述获得的正丁醇部位加入乙醇，沉淀时在容器壁上析出结晶，反复多次操作，多次重结晶得化合物23，正丁醇部位经中压反相C₁₈分离，用水-甲醇溶液(5％～100％)梯度洗脱，洗脱液按同一梯度合并，减压回收溶剂得到Z-Ⅰ～Z-Ⅵ共6个组分，Z-Ⅱ组分经由MCI树脂分离，用水-甲醇溶液(0％～100％)梯度洗脱，并用C₁₈半制备柱分离纯化得化合物7、化合物8、化合物9、化合物10，化合物7即为过氧麦角甾醇。

7.根据权利要求6所述的EGFR靶点抗体的组合物，其特征在于：上述圆孢蘑菇子实体与乙醇比例为0.5-1:1-5，使乙醇完全浸泡圆孢蘑菇子实体。

8.根据权利要求6所述的EGFR靶点抗体的组合物，其特征在于：上述减压回收条件为0.1-0.5MPA，温度25-40℃；上述超声提取条件为200-800HZ，超声30-45min，温度30-50℃。

9.根据权利要求6所述的EGFR靶点抗体的组合物，其特征在于：上述浸膏萃取条件为：萃取压力为20MPa～40MPa，萃取温度30℃～50℃，萃取时间为0.8h～2.5h。

10.任一权利要求1-3的EGFR靶点抗体的组合物的应用，其特征在于：过氧麦角甾醇和EGFR靶点抗体的组合物在头颈部鳞状细胞癌上应用。