[发明专利]一种生产果胶酶的液体发酵方法

权利要求书

1.一种生产果胶酶的液体发酵方法，其特征在于，发酵菌种为黑曲霉(Aspergillusniger)LD-092，菌株保藏号为CGMCC No.18559；

发酵方法具体如下：将种子液按照接种量6-8％的比例接入发酵培养基，恒温30-31℃，转速200-250r/min，设置通风量：1-2vvm，pH为4.5，发酵周期为150h-155h；

发酵全程利用补料培养基控制发酵液pH值为4.5，所述补料培养基组成为：麦芽糖600g/L，玉米浆22g/L，硫酸镁1.5g/L，121℃灭菌30min。

2.如权利要求1所述的生产果胶酶的液体发酵方法，其特征在于，所述发酵培养基组成为：玉米淀粉300g/L，豆饼粉30g/L，细麸皮50g/L，玉米浆27g/L，硫酸镁1.2g/L，硫酸铵4g/L，磷酸二氢钠2.5g/L，氯化钙0.8g/L，pH 4.5，121℃灭菌30min。

3.如权利要求1所述的生产果胶酶的液体发酵方法，其特征在于，将最终发酵液通过提取与精制方法，获得果胶酶成品液体酶制剂，所述果胶酶的提取与精制方法如下：

先将最终发酵液加入1～5％珍珠岩助滤剂，压滤得到澄清压滤酶液；

用20000分子量超滤膜对所述澄清压滤酶液进行超滤浓缩，得到浓缩液；

在所述浓缩液中加入质量百分比15％稳定剂、0.45％防腐剂，调节pH4.5，然后进行过滤除菌，即得到果胶酶成品液体酶制剂。

4.如权利要求3所述的生产果胶酶的液体发酵方法，其特征在于，所述稳定剂为甘油，所述防腐剂为质量比为1:2的山梨酸钾和苯甲酸钠。