[发明专利]一种叶酸修饰的钼钒多酸/C3

说明书

本发明公开了一种叶酸修饰的钼钒多酸/C₃N₄复合材料，通式为(FA)₆(NH₄)₅PMo₄V₈O₄₀/C₃N₄(nwt％)，其中FA为叶酸分子，n表示多酸的担载量，取值为5，10，15，20，25，30；以及复合材料的制备方法和利用其快速检测前列腺癌标记物的方法。本发明制备得到的(FA)₆(NH₄)₅PMo₄V₈O₄₀/C₃N₄(nwt％)复合材料条件温和、灵敏度高、显色反应快，在显色剂3，3‑，5，5‑四甲基联苯胺的存在下，可以同时对H₂O₂和肌氨酸进行显色检测，该方法可以替代目前使用的辣根过氧化酶和肌氨酸氧化酶完成对肿瘤细胞的靶向检测。

技术领域

本发明涉及生物医药及临床诊断技术领域，更具体的说是涉及一种基于含钒钼杂多酸叶酸化合物负载在C₃N₄上所形成的(FA)₆(NH₄)₅PMo₄V₈O₄₀ /C₃N₄(nwt％)复合物替代肌氨酸氧化酶/过氧化氢氧化酶双重模拟物的合成方法以及同时显色检测H₂O₂和肌氨酸的技术。

背景技术

前列腺癌(PCa)严重困扰着男性患者，在初期检测中经常用方法有包括直肠指检、直肠超声、前列腺穿刺活检、电子计算机断层扫描(CT)和多重内反射(MIR)等，这些检测手段价格昂贵、操作复杂，同时对患者造成极大的心理负担以及生理伤害，还会导致对病情的误判或过度治疗，发展一种高效便捷、快速的具有人文关怀的方法迫在眉睫。Sreekumar组最早发现肌氨酸(N- 甲基甘氨酸)能有效的感应到PCa癌细胞的侵入，可以确定癌细胞的生长行为。通过分析病人血液和尿液的肌氨酸浓度的变化，可以准确判断PCa癌细胞的生长阶段。因此，肌氨酸成为一种有效且准确的生物标记物来进行PCa的临床诊断，当血液或尿液中肌氨酸浓度高于5μM(0.17ppm)时，可以作为PCa 早期判断依据。

目前，肌氨酸检测方法包括光谱测定法、同位素内标法、荧光时间衰减光谱法等，都存在着操作困难、费时、测试费用偏高等问题。显色免疫分析作为一种分析方法，具有分析过程简单快速、成本低、现象直观容易判断等优点。其原理是利用抗原和抗体的特异性结合反应并通过颜色的变化来检测各种物质(如药物、激素、蛋白质、微生物、癌细胞等)。其中，显色免疫分析由于具有分析过程简便快捷、实用性强、灵敏度高、成本低和直接通过反应过程中颜色的变化进行检测等优点，在众多领域都引起了广泛的关注，发展出酶联免疫法(ELISA)、化学发光免疫、免疫芯片法以及胶体金层析法。其中ELISA法是通过酶标记物的酶催化3，3-，5，5-四甲基联苯胺(TMB) 发生氧化显色反应(无色到蓝色)来判断被测物的含量，常用的标记酶有辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酯酶(AP)和β-D半乳糖苷酶(Gal)，采用的氧化剂包括空气和过氧化氢。ELISA法操作方便、检测迅速、一次检测样品量大、价廉。但生物酶易受外界温度、体系pH值的影响而变性，且制备、纯化及储存耗时长、价格昂贵、过程复杂，同时样品处理复杂、干扰严重。因此，高效HRP模拟酶的合成越来越受到人们的关注，同时替代H₂O₂使用环境更友好的氧化剂如氧气更加具有挑战性和实用性。