[发明专利]一株高效解磷假单胞菌及其微生物菌剂和应用

说明书

本发明属微生物技术领域，具体涉及一株高效解磷假单胞菌及其微生物菌剂和应用。该菌株于2019年4月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，菌种保藏号为CGMCCNo.17557。该菌能够高效地将难溶性无机磷转化为可溶性有效磷，以磷酸钙为唯一磷源时，其溶磷量可达793 mg/L。将该菌制备成解磷菌剂，可广泛用于农业生产中，能够有效提高土壤中有效磷的含量，达到节肥增产的效果，具有良好的社会、经济和环境效益。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株高效解磷假单胞菌及其微生物菌剂和应用。

背景技术

磷是植物生长所必须的营养元素之一，参与植物体内大部分的新陈代谢过程。然而，环境中的磷通常以磷酸钙盐的形式存在，不能被植物直接吸收和利用，导致大部分耕地严重缺磷。由于磷是不可再生的矿质资源，土壤中磷含量不足已成为制约农作物产量的重要因素。因此，农业生产上通常以施用磷肥的方式来解决上述问题。但是，磷肥进去土壤后，大部分磷会淋失、挥发或者与土壤中的Ca⁺、Fe³⁺、Al³⁺等离子结合形成难溶的磷酸盐，作物仍然无法吸收利用，导致磷肥的利用率仅有20%左右。

微生物对土壤中磷利用率的影响作用较大，解磷菌能够将难溶性磷转化为植物能够吸收利用的可溶性有效磷，供植物吸收利用。

发明内容

本发明的目的是为基于上述现有技术状况，提供一株基于自主分离筛选的高效解磷假单胞菌及其应用，本发明筛选得到的解磷菌1416X3，其原始解磷能力为741 mg/L，优化其生长的无机磷发酵培养基初始pH和培养温度后，其解磷能力可达793 mg/L，将该菌制成微生物菌剂，利用解磷菌剂和肥料的共同作用来促进植物生长，可增加作物产量，提高土壤中磷的有效利用率，改善土壤质量，对农业、经济和环境具有非常重要的意义。

本发明的目的是采用以下技术方案来实现的：

以磷酸钙作为控制磷源，采用平板筛选法从太湖沉积物样品中初筛得到12株具有溶磷圈的细菌，再采用摇瓶培养法复筛，得到一株高效解磷的假单胞菌1416X3，该菌的菌落呈圆形、黄色，细胞杆状，革兰氏染色阴性。该菌株已于2019年4月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，其菌种保藏号为CGMCC No. 17557。

利用上述假单胞菌1416X3生产微生物菌剂的方法如下：

1）将上述假单胞菌1416X3接种于LB液体培养基中，培养至对数生长期（菌量约10⁸CFU/mL），震荡培养；培养条件为温度25-30 ℃、转速150-200 rpm，500 mL三角瓶装液量150-250 mL，培养时间24-36 h；

所述LB培养基成分组成为：酵母提取物5 g/L，胰蛋白胨10 g/L，NaCl 10 g/L，pH 7.0-7.2，121 ℃灭菌20 min。

2）按照1-5%接种量将培养好的种子液接种于含有磷酸钙的无机磷液体培养基中，初始pH 7.0-7.2，温度25-30℃，转速150-200 rpm，发酵24-36 h；

所述无机磷发酵培养基成分组成为：葡萄糖15 g/L，MgCl₂·6H₂O 5 g/L，MgSO₄·7H₂O0.25 g/L，KCl 0.2 g/L，(NH₄)₂SO₄ 0.2 g/L，Ca₃(PO₄)₂ 5 g/L，pH 7.0-7.2，115 ℃灭菌30min。

3）发酵结束后，培养液罐装成微生物菌剂。培养液中可溶性磷含量可达793 mg/L，解磷效果显著。