[发明专利]GRG1基因改良麻竹株型的方法及应用

权利要求书

1.一种麻竹GRG1基因，其核苷酸序列如SEQ ID No .3或SEQ ID No .4或SEQ ID No .5所示。

2.一种改良麻竹株型的方法，其特征在于，改变麻竹中GRG1基因的表达使其功能丧失，包括以下步骤：

（1）麻竹中GRG1基因克隆及靶位点设计；所述GRG1基因，其核苷酸序列如SEQ ID No .3或SEQ ID No .4或SEQ ID No .5所示；

（2）构建sgRNA表达盒，将sgRNA表达盒与pYLCRISPR/Cas9Pubi-H载体连接，构建麻竹GRG1基因编辑载体；所述pYLCRISPR/Cas9Pubi-H载体结构如图1a所示；

（3）将构建好的麻竹GRG1基因编辑载体转入农杆菌EHA105，并以农杆菌介导法对麻竹愈伤组织进行携带GRG1基因编辑载体农杆菌EHA105的侵染；

（4）进行麻竹愈伤组织筛选、增殖、分化、生根培养；

（5）PCR鉴定筛选阳性麻竹突变体植株；

（6）对阳性麻竹突变体植株的编辑基因编辑效率和编辑类型进行分析。

3.根据权利要求2所述的一种改良麻竹株型的方法，其特征在于：步骤 （2）中所述sgRNA表达盒的构建具体为：先设计带有特殊碱基接头的含有target的引物，target引物退火互补形成靶点接头，通过酶切、连接手段使靶点接头连接至中间载体pYLsgRNA-OsU6c上，使靶点接头与gRNA组装在一起，构建获得 sgRNA表达盒；所述pYLsgRNA-OsU6c载体结构如图1b所示。

4.根据根据权利要求3所述的一种改良麻竹株型的方法，其特征在于：所述带有特殊碱基接头的含有target的引物为：Target F-c：5’-tcaGCGTGTGCCACCCCAGCGTG-3’，Target R-c：5’-aaacCACGCTGGGGTGGCACACG-3’。

5.如权利要2所述一种改良麻竹株型的方法在生长加快的麻竹转基因植株育种中的应用。