[发明专利]表面增强拉曼光谱法检测尿液中嘌呤类抗肿瘤药物的方法

说明书

本发明公开了一种表面增强拉曼光谱法检测尿液中嘌呤类抗肿瘤药物的方法，包括如下步骤：S1、待测尿液预处理：取待测尿液，加入酰胺类化合物混匀，调节pH＝2.5‑3，过滤，取滤饼用氢氧化钠水溶液调节pH＝10‑14得到解吸液；S2、检测：取解吸液与金纳米颗粒溶胶混匀得到混合液，取混合液滴在硅片表面，干燥后用拉曼光谱仪检测。本发明通过添加酰胺类化合物对尿液中的嘌呤类抗肿瘤药物进行预处理提取，配以合适直径的金纳米颗粒作为信号放大的检测基底和适宜的拉曼光谱仪检测条件，从而实现快速、无损、实时的检测尿液中的嘌呤类抗肿瘤药物。

技术领域

本发明涉及抗肿瘤药物检测技术领域，尤其涉及一种表面增强拉曼光谱法检测尿液中嘌呤类抗肿瘤药物的方法。

背景技术

肿瘤是严重威胁我国人群健康的主要疾病之一，每天约1万人确认癌症，平均每分钟就有7人因癌症而死亡，且近十几年来肿瘤的发病死亡率仍呈持续上升态势。嘌呤类抗肿瘤药物是嘌呤类抗代谢型抗癌药，在体内受黄嘌呤核苷酸焦磷酸酶催化转化为活性的硫代次黄嘌呤核苷酸和硫代肌苷酸，从而阻止DNA与RNA合成，其在急性白血病、慢性粒白血病、绒毛膜上皮癌、恶性淋巴瘤和多发性骨髓瘤的急变期的治疗等方面有重要应用。在临床治疗中，对嘌呤类用量要求非常高，如果浓度过低会降低其抗免疫和抗炎作用，从而达不到效果，如果浓度过高会有抑制骨髓、损害肝脏等副作用。所以，快速准确测定嘌呤类抗肿瘤药物的浓度，对临床用药具有指导意义。

目前，常见的嘌呤类抗肿瘤药物检测方法为光度法、质谱法、放射物标记法、高效液相色谱等方法，这些方法实现嘌呤类的检测，但是检测方法往往耗费时间长，设备操作繁琐。表面增强拉曼散射(SERS)作为一种超灵敏的表面光谱分析技术，因其操作简单、测量快速、结构简单等特点已被广泛应用于生物，环境和化学等方面。SERS在水的拉曼散射很低，所以特别适用于水溶液环境中的检测，而嘌呤类抗肿瘤药物存在于生物体液中，因此利用SERS技术对其检测具有较大的优势。

人体常见的体液有尿液、血液、汗液和唾液等，由于尿液取样方便且包含代谢物的信息作为常见的分析的生物检材。尿液中成分复杂，除了水之外还包含尿素、尿酸和白蛋白，这些会干扰检测结果。因此对尿液中的嘌呤类抗肿瘤药物的分离和提取对SERS检测是十分重要和必要的。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种表面增强拉曼光谱法检测尿液中嘌呤类抗肿瘤药物的方法，本发明通过添加酰胺类化合物对尿液中的嘌呤类抗肿瘤药物进行预处理提取，配以合适直径的金纳米颗粒作为信号放大的检测基底和适宜的拉曼光谱仪检测条件，从而实现快速、无损、实时的检测尿液中的嘌呤类抗肿瘤药物。

本发明提出的一种表面增强拉曼光谱法检测尿液中嘌呤类抗肿瘤药物的方法，包括如下步骤：

S1、待测尿液预处理：取待测尿液，加入酰胺类化合物混匀，调节pH＝2.5-3，过滤，取滤饼用氢氧化钠水溶液调节pH＝10-14得到解吸液；

S2、检测：取解吸液与金纳米颗粒溶胶混匀得到混合液，取混合液滴在硅片表面，干燥后用拉曼光谱仪检测。

优选地，在S1中，酰胺类化合物为聚酰胺、聚丙烯酰胺、聚己二酰己二胺中的至少一种。

优选地，在S1中，待测尿液与酰胺类化合物的重量比为1：1-1.5。

优选地，在S2中，拉曼光谱检测条件为：激光波长为785nm，功率为100-500mW，采谱时间为每次1-8s。

优选地，在S1中，氢氧化钠水溶液的浓度为0.01-0.05M。

优选地，在S1中，用盐酸调节pH＝2.5-3。

优选地，在S2中，取2-3μL混合液滴在硅片表面。

优选地，在S2中，金纳米颗粒的直径为45-55nm。

优选地，在S2中，金纳米颗粒的直径为50nm。