[发明专利]E3泛素连接酶stub1在抑制乙型肝炎病毒复制中的应用

说明书

本发明公开了一种E3泛素连接酶stub1在抑制乙型肝炎病毒复制中的应用，涉及生物医药领域，所述应用是指E3泛素连接酶stub1基因或所述E3泛素连接酶stub1基因的表达产物在抑制乙型肝炎病毒复制中的应用。本发明提供的E3泛素连接酶stub1能够泛素化HSP90的底物蛋白，并与乙型肝炎病毒核心蛋白HBc结合、缩短其半衰期，下调衣壳蛋白，有效抑制乙肝病毒的复制，且弥补了衣壳蛋白抑制剂如HAPs等类药物代谢快、半衰期短的缺点，在抑制、清除乙肝病毒方面具有良好的应用前景。而且，因为E3泛素连接酶stub1发挥功能需要与HSP70、HSP90形成符合体并降解乙肝的衣壳蛋白，所以HSP90抑制剂可以增强其功能，发挥stub1类似的功能。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种E3泛素连接酶stub1在抑制乙型肝炎病毒复制中的应用。

背景技术

乙型肝炎病毒(HBV)属于嗜肝DNA病毒科。HBV感染导致慢性乙型肝炎，并与肝硬化、肝癌的发生、发展密切相关。50％以上的原发性肝癌与HBV相关。我国是HBV感染高发区，有超过一亿人的HBV携带者。目前批准的抗病毒药物主要有干扰素(包括IFN-α和PEG-IFN)和核苷酸类似物，它们可以抑制病毒逆转录酶，降低病毒滴度，但它们对乙肝病毒的清除率很低。

HBV核心蛋白(HBc)，也称为衣壳蛋白，为病毒结构蛋白，是HBV核衣壳的主要组成成分。目前针对衣壳蛋白的抑制剂成为抗HBV药物研发的热点。Deres,K等研究人员在筛选抑制乙肝复制的药物时发现异芳基二氢嘧啶(heteroaryldihydropyrimidines，HAPs)如Bay41-4109，可以通过与HBc结合抑制核衣壳的正常组装，同时使得HBc的半衰期大大缩短。目前，一些HAPs化合物已在进行I期、II期临床实验，但这些化合物在体内的代谢速度很快，在动物水平效果还有待改善。

HBV的复制需要许多细胞蛋白的帮助，如热休克蛋白90(HSP90)等。同时一些细胞的蛋白如apobec3c等也是HBV的复制的限制因子。Stub1是一个E3泛素连接酶，能泛素化与热休克蛋白结合的底物蛋白。Stub1是否泛素化HSP90的底物蛋白决定了该底物蛋白是被HSP90重折叠，还是被降解。因此，stub1在细胞的蛋白质质量控制和蛋白质平衡中起了关键的角色。

因此，本领域的技术人员致力于开发一种E3泛素连接酶，能够下调乙肝病毒衣壳蛋白，弥补HAPs等类药物代谢快、半衰期短的缺点，提高抑制乙肝病毒复制的效果。

发明内容

有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是如何开发一种E3泛素连接酶，使其具有下调乙肝病毒衣壳蛋白、高效抑制乙肝病毒复制的效果，且不存在代谢快、半衰期短等缺点。

为实现上述目的，本发明提供了一种E3泛素连接酶stub1在抑制乙型肝炎病毒复制中的应用。

进一步地，所述应用是指E3泛素连接酶stub1基因或所述E3泛素连接酶stub1基因的表达产物在抑制乙型肝炎病毒复制中的应用。

进一步地，所述E3泛素连接酶stub1基因的表达产物包括stub1蛋白，以及具有该活性的stub1的突变体和功能结构域。

进一步地，所述E3泛素连接酶stub1基因可通过载体递送到感染乙型肝炎病毒的细胞中发挥作用。

进一步地，所述载体包括腺病毒、腺相关病毒、慢病毒、质粒。

进一步地，所述E3泛素连接酶stub1能够与HSP90的客户蛋白HBc结合，缩短其半衰期，并由此下调HBc蛋白水平。

进一步地，还可结合HSP90抑制剂使用，通过增强所述E3泛素连接酶stub1的功能，从而发挥作用。

进一步地，所述HSP90抑制剂包括格尔德霉素及其衍生物。

进一步地，还可结合衣壳蛋白抑制剂使用。