[发明专利]一种发酵生产平阳霉素的方法

说明书

本发明公开了一种发酵生产平阳霉素的方法。本发明公开了发酵生产平阳霉素的方法，包括将轮枝链霉菌在发酵培养基中进行发酵，在发酵过程中向所述发酵培养基中添加外源前体物得到含平阳霉素的发酵产物，从所述发酵产物中分离得到平阳霉素；其中，所述外源前体物为物质A和/或物质B，所述物质A为腺苷甲硫氨酸或其同类氨基酸衍生物，所述物质B为亚精胺或亚精胺盐。本发明发酵生产平阳霉素方法简单、有效、能够快速提高平阳霉素发酵生产水平，降低生产成本，无需额外对设备与人力，能够大幅度提高平阳霉素工业发酵水平，适合工业化规模生产。

技术领域

本发明属于发酵工程领域，具体的涉及一种发酵生产平阳霉素的方法。

背景技术

平阳霉素是从轮枝链霉菌发酵产物中发现的具有抗肿瘤活性的单组分糖肽类抗生素，末端胺为亚精胺。平阳霉素是广谱、低毒的抗肿瘤药物。对恶性淋巴瘤、头颈部癌、乳腺癌有良好的疗效。还对无有效药物治疗的肝癌有较满意的疗效。因此提高平阳霉素的在发酵液中的含量、提高生产产量，满足市场需求具有非常重要的意义。

目前国内研究提高平阳霉素的方法主要是围绕菌种选育、优化发酵培养基处方改变发酵工艺，虽然取得了一定的成绩然而工作量巨大、收效甚微工业化生产发酵水平单指平阳霉素单组分目的产物一般为50-80U/ml且发酵生产水平极不稳定。

发明内容

本发明要解决的技术问题为如何提高平阳霉素的产量。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种发酵生产平阳霉素的方法。

本发明发酵生产平阳霉素的方法，包括将轮枝链霉菌(Streptomycesverticillus var.pingyangensis)在发酵培养基中进行发酵，在发酵过程中向所述发酵培养基中添加外源前体物得到含平阳霉素的发酵产物，从所述发酵产物中分离得到平阳霉素；其中，所述外源前体物为物质A和/或物质B，所述物质A为腺苷甲硫氨酸或其同类氨基酸衍生物，所述物质B为亚精胺或亚精胺盐。

上述方法中，所述外源前体物可以以固体或溶液的形式加入到发酵培养基中，在发酵至40-60h时加入，此时，镜检可见菌丝密网形成，当菌丝体出现分化自溶后再加入会影响平阳霉素单组分产生效果。

上述方法中，所述外源前体物的添加量为使得所述外源前体物在发酵培养基中的浓度为0.4g/L～0.6g/L。当所述外源前体物为物质A和物质B时，所述浓度为物质A和物质B的总质量浓度，其中，所述物质A与物质B的质量比为1∶4～1∶6。

上述方法中，所述发酵培养基为不含物质A和/或物质B的发酵培养基。

上述方法中，所述发酵培养基可由以下各质量百分含量的组分组成：淀粉2.5-3.0％、玉米浆2.5-3.5％、黄豆饼粉2.5-3.2％、硫酸铜0.01-0.02％、麦芽糖3.0-3.5％、大豆蛋白胨0.3-0.5％、氯化钠0.3-0.35％、其余为水。

上述方法中，所述发酵的条件如下：

发酵温度：28±2℃；

发酵时间：140-170h；

发酵压力：0.02～0.06Mpa；

空气流量(v/v)：1∶0.6-1；

搅拌转速：50-400rpm；

溶氧控制：发酵时间0-35h溶氧大于等于25％、发酵时间36-120h溶氧大于等于30％、发酵时间121h后大于等于40％；

pH控制：发酵时间0-72h控制至6.90以下，发酵时间72h后控制至7.45以下。

上述方法中，还包括在发酵前，采用种子培养基培养轮枝链霉菌，得到轮枝链霉菌的种子液再移种到发酵培养基中进行发酵。