[发明专利]工程化抗原递呈细胞及其在用于活化CD3+免疫细胞中的应用

说明书

本发明公开工程化抗原递呈细胞及其在用于活化CD3+免疫细胞中的应用。本发明的工程化抗原递呈细胞通过工程化手段在野生型抗原递呈细胞内引入外源基因从而过表达重组白介素‑12和可溶性CD80而得到。本发明通过重组白介素‑12和可溶性CD80的组合协同作用促进CD3+免疫细胞的活化。

技术领域

本发明涉及免疫学以及医药领域，具体地涉及工程化抗原递呈细胞及其在用于活化CD3+免疫细胞中的应用。

背景技术

白细胞介素-12(interleukin-12，IL-12)由抗原提呈细胞和B细胞产生，是一种异源二聚体形式的前炎症细胞因子，并以这种形式分泌到细胞外。IL-12能诱导IFN-γ产生，在体内免疫应答中(特别是在细菌或寄生虫感染中)它也是IFN-γ产生所必需。

DC细胞是合成IL-12的第一个细胞，并发现它依赖于IFN-γ和来自T细胞的信号。和其他的炎症细胞因子相似，IL-12的生成受正性和负性调节机制严格控制。不同的细胞因子如IFN-γ、TNF-β、GM-CSF能增强细胞产生IL-12的能力，IFN-γ能增强编码p40和p35的基因的转录，它对异源二聚体的产生具有特别明显的效应，在炎症和Th1应答中，IFN-γ与IL-12生成的能力形成正反馈机制。

在机体抗肿瘤免疫中，肿瘤可以通过免疫耐受、抗原调变和免疫抑制因子等方式进行免疫逃避。研究发现，肿瘤患者存在DC数量减少及功能缺陷的特点，肿瘤组织及其周围浸润DC的数量、功能与肿瘤的发生、发展、转移、预后有着密切的关系。DC密集浸润的肿瘤分化程度高，预后较好；而DC轻度浸润的肿瘤常伴有分化程度低和恶性进展。肿瘤细胞具有较高水平的Fas表达，能诱导FasL表达的淋巴细胞凋亡，并能分泌TGF-β、IL-10等免疫抑制性细胞因子，导致抗原提呈能力下降，从而逃避免疫攻击。

近年来，已经清楚了免疫系统确实识别肿瘤抗原，但是尽管存在肿瘤抗原，T细胞确保持静止状态。有假说认为：患者体内的抗原呈递细胞，不能正确识别肿瘤抗原，将之呈递给T淋巴细胞，引起肿瘤特异的免疫应答。因此，如何活化免疫耐受的免疫细胞，引起肿瘤特异的免疫应答成为目前肿瘤免疫研究中的一个重点。

发明内容

本发明提供一种工程化免疫细胞，用于解决现有技术中的至少部分技术问题。本发明发现通过工程化手段改造抗原递呈细胞使其在过量表达重组的白介素-12的同时分泌可溶性的CD80片段可以大大提高其活化CD3+免疫细胞的能力。至少部分地基于该发现完成了本发明。具体地，本发明包括以下内容。

本发明的第一方面，提供一种工程化抗原递呈细胞，其通过工程化手段在野生型抗原递呈细胞内引入外源基因从而过表达重组白介素-12和可溶性CD80而得到。

根据本发明的工程化抗原递呈细胞，其中，所述外源基因包含编码重组白介素-12的基因和编码可溶性CD80的基因。

根据本发明的工程化抗原递呈细胞，其中，所述重组白介素-12为p40和p35两个亚基的融合蛋白，且编码所述重组白介素-12的基因序列如SEQ ID No.1所示或与其同源性为95％以上且来源于同一物种。

根据本发明的工程化抗原递呈细胞，其中，所述可溶性CD80包含CD80的胞外区，编码所述可溶性CD80的基因序列如SEQ ID No.2所示或与其同源性为95％以上且来源于同一物种。

根据本发明的工程化抗原递呈细胞，其进一步包含抗原或编码所述抗原的核酸。

根据本发明的工程化抗原递呈细胞，其中，所述抗原为GPC3抗原。

根据本发明的工程化抗原递呈细胞，其中，其为树突细胞。

本发明的第二方面，提供一种免疫调节组合物，其包含第一方面所述的工程化抗原递呈细胞和/或其分泌物。