[发明专利]一种评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性的方法

权利要求书

1.一种评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性的方法，其特征在于，所述方法包括：

对转基因大豆与野生大豆分批种植，使二者的花期相遇；

当野生大豆与转基因大豆花期相遇时，选择野生大豆植株中上部未发生自交且柱头已经成熟的花蕾，用镊子去掉花萼，捏住整个花冠中部，斜向旗瓣方向轻轻用力，将整个花冠连同花药一同去除，然后取周围新鲜的叶片，包裹在花蕾外围，以保护裸露的柱头；

先取下野生大豆去雄花蕾上包裹的叶片，选取父本转基因大豆花冠还未完全张开且花朵旗瓣高于萼片的花蕾，取出其花药并在野生大豆去过雄的柱头上摩擦，以确保父本花粉散落到母本花蕾的柱头上，授粉完成后，包裹上新鲜叶片；

选取野生大豆植株上的花蕾，生长状态同杂交时花蕾状态一致，不做其他处理，对选取的花蕾做好标记；

种子成熟时，对自然条件自交生长成熟的荚和杂交成功生长成熟的荚进行收获，分别统计两种方法下成熟的饱粒种子数；

根据公式：饱粒数比（%）=（杂交饱粒数/自交饱粒数）×100%计算饱粒比，以饱粒比来评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性；杂交亲和性评价指标及分级命名为：

1级：饱粒比 3.0%，亲和性极高，

2级：3.0% ≥ 饱粒比 2.0%，亲和性高，

3级：2.0% ≥ 饱粒比 1.0%，亲和性中，

4级：1.0% ≥ 饱粒比 0.5%，亲和性低，

5级：0.5% ≥ 饱粒比，亲和度极低；

杂交和自然条件中选取大豆植株上的花蕾数目至少200朵；

将杂交试验结荚率数据进行分组统计，每个处理至少4次重复，每次重复统计至少20个荚，不足20则全部统计。

2.根据权利要求1所述的一种评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性的方法，其特征在于，材料播种在底部有孔的塑料花盆，种植基质为农田土壤与有机栽培土1：1混匀；野生大豆每盆种1株，8株为一个重复，共4次重复，种植1批；转基因大豆每盆种1株，8株为一个重复，共4次重复，种植3批，每批间隔10天，以选择能够与野生大豆花期相遇的转基因大豆；在材料的整个生长周期进行正常的田间管理，包括浇水、除草、杀虫；在野生大豆长至第3个三出复叶时，在植株旁边插上2米长的竹竿，便于野生大豆的爬蔓生长。

3.根据权利要求1所述的一种评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性的方法，其特征在于，选取花蕾的花冠低于最高花萼0.5mm-1mm，花蕾柱头膨大透明呈圆盘状但花药未破裂散开。

4.根据权利要求1所述的一种评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性的方法，其特征在于，去雄步骤的操作时间为下午17:00 ~ 19:00。

5.根据权利要求1所述的一种评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性的方法，其特征在于，人工授粉的操作时间为上午6:00 ~ 8:00。

6.根据权利要求1所述的一种评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性的方法，其特征在于，人工授粉完成后包裹上新鲜叶片保持5~7d，等待人工杂交授粉的花朵形成幼荚，此时去掉原本包裹在杂交花朵周围已经干了的叶片，此后任幼荚自然生长至成熟。