[发明专利]免疫调节因子IDR-1018衍生肽及其应用

说明书

本发明公开了免疫调节因子IDR‑1018衍生肽及其应用，特点是通过对抗菌肽IDR‑1018分子结构进行优化设计得到新型衍生肽1018M，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；通过对抗菌肽IDR‑1018 D型氨基酸替换得到新型衍生肽D1018，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；优点是抗菌肽1018M、D1018对革兰氏阳性菌和阴性菌具有很好的杀菌效果，且1018M较母体肽显著降低了对小鼠红细胞的溶血活性，D1018较母体肽显著提高了对蛋白酶的稳定性，1018M、D1018对生物膜抗性较母体肽均显著提高。

技术领域

本发明涉及一种抗菌肽，尤其是涉及一种免疫调节因子IDR-1018衍生肽及其应用。

背景技术

抗菌肽是由生物有机体产生的前体经蛋白酶降解形成的具有生物学活性的小分子多肽，主要构成了机体防御的第一道防线。抗菌肽对细菌的作用机制主要是以膜作为靶位点，通过静电力和受体介导的细胞膜作用力，引起膜通透性改变，降低细胞膜稳定性，或插入细胞膜中形成跨膜的孔洞，最终导致细菌内容物外泄而死亡。由于抗菌肽特殊的作用机制，使其不易产生耐药性，并且对许多临床耐药菌同样具有杀菌作用。因此，抗菌肽被认为可以替代传统抗生素，应用于医药卫生、饲料添加剂和食品防腐等领域。

虽然天然抗菌肽具有普遍的优点，但也存在着某些明显的不足，例如，部分抗菌肽活性相对较低，临床应用中对真核细胞具有强毒性、选择性差，对真核生物体内的正常菌群起到一定的杀伤作用，造成代谢的紊乱，这些都是限制抗菌肽发展的瓶颈。因此，以抗菌肽的结构与功能的关系研究为基础，通过生物信息学方法，对现有抗菌肽进行全新设计和结构改造，以期获得高抗菌活性、低毒性的抗菌肽衍生物。

固有免疫调节因子(innate defense regulator，IDR)IDR-1018(VRLIVAVRIWRR-NH₂)是以抗菌肽bactenecin线性突变体Bac2A(RLARIVVIRVAR-NH₂)为模板，通过氨基酸替换、重新排序改造获得的结构简单具有抗菌、抗生物膜、免疫调节活性及低溶血性小肽。但是在其进一步的临床应用中由于体内不稳定性及活性有限而受到制约。因此，亟需通过对抗菌肽的设计改造，提高抑菌、抗生物膜活性及稳定性，同时降低溶血活性。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种高抗菌性、抗生物膜活性、高稳定性以及低溶血活性的免疫调节因子IDR-1018衍生肽及其应用。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：

1、免疫调节因子IDR-1018衍生肽，该衍生肽为1018M肽或/和D1018肽，其中1018M肽的氨基酸序列如VRLRWWRRRWRR-NH₂所示，D1018肽的氨基酸序列如VRLIVAVRIWRR-NH₂所示。

2、上述免疫调节因子IDR-1018衍生肽的制备方法，以IDR-1018母体肽序列为基础，将第4-7和9位的氨酸残基I、V、A、V、I替换为R、W、W、R、R，得到一个突变体抗菌肽1018M，其氨基酸序列如VRLRWWRRRWRR-NH₂所示。

3、上述免疫调节因子IDR-1018衍生肽的制备方法，以IDR-1018母体肽序列为基础，对抗菌肽IDR-1018进行D型氨基酸替换，得到一个新型衍生肽D1018，其氨基酸序列如VRLIVAVRIWRR-NH₂所示。

4、编码上述免疫调节因子IDR-1018衍生肽的基因，所述的1018M肽的核苷酸序列如gtgcgcctgcgctggtggcgccgccgctggcgccgc所示。