[发明专利]一种分离洋艾内酯A、B的HPLC方法

说明书

本发明公开了一种分离洋艾内酯A、B的HPLC方法，色谱柱：Waters Sunfire C18液相色谱柱，规格为4.6mm×250mm、5μm；流动相：A相为体积百分浓度10％的甲醇水溶液，其中含有10mM手性添加剂；B相为体积百分浓度90％的甲醇水溶液，其中含有10mM手性添加剂；洗脱程序：0～5min，0％B；5～20min，0％～80％B；20～25min，80％～0％B；流速：1.0mL/min；柱温：35℃。本发明通过在流动相中添加手性添加剂D‑脯氨酰胺，无需借助手性色谱柱即可实现洋艾内酯A和洋艾内酯B的分离。因此本发明HPLC方法可用于检测洋艾内酯A中是否混有洋艾内酯B或洋艾内酯B中是否混有洋艾内酯A。

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种分离洋艾内酯A、B的HPLC方法。

背景技术

洋艾内酯A和洋艾内酯B是一对同分异构体，其区别仅在一个连接-OH和-CH₃的碳原子的手性不同，洋艾内酯A、B的化学结构式如下：

由于洋艾内酯A和洋艾内酯B的化学结构极其相似，普通的HPLC方法较难将二者分开，因而无法用于检测洋艾内酯A中是否混有洋艾内酯B或洋艾内酯B中是否混有洋艾内酯A。

为了高效分离洋艾内酯A和洋艾内酯B，特提出本发明。

发明内容

本发明是为了克服现有技术中存在的不足，提供一种分离洋艾内酯A、B的HPLC方法。

本发明技术方案如下：

一种分离洋艾内酯A和洋艾内酯B的HPLC方法，包括如下色谱参数：

色谱柱：Waters Sunfire C18液相色谱柱，规格为4.6mm×250mm、5μm；

流动相：A相为体积百分浓度10％的甲醇水溶液，其中含有10mM手性添加剂；B相为体积百分浓度90％的甲醇水溶液，其中含有10mM手性添加剂；洗脱程序：0～5min，0％B；5～20min，0％～80％B；20～25min，80％～0％B；

流速：1.0mL/min；

柱温：35℃。

进一步地，所述手性添加剂为D-脯氨酰胺。

进一步地，检测波长为234nm。

进一步地，进样量为10μL。

有益技术效果：

本发明通过在流动相中添加手性添加剂D-脯氨酰胺，可以有效分离洋艾内酯A和洋艾内酯B，基于该流动相的HPLC方法无需借助手性色谱柱即可实现手性化合物洋艾内酯A和洋艾内酯B的高效分离。因此本发明提供的HPLC方法可以用于检测洋艾内酯A中是否混有洋艾内酯B或洋艾内酯B中是否混有洋艾内酯A。

附图说明

图1为洋艾内酯A和洋艾内酯B的HPLC分离色谱图(手性流动相)，其中：A为洋艾内酯A对照品溶液，B为洋艾内酯B对照品溶液，C为混合对照品溶液；

图2为洋艾内酯A和洋艾内酯B的HPLC分离色谱图(普通流动相)，其中：A为洋艾内酯A对照品溶液，B为洋艾内酯B对照品溶液，C为混合对照品溶液。

具体实施方式

下面通过具体的实施例详细介绍本发明实质性内容，但不能以此限定本发明的保护范围。

一、试验材料

洋艾内酯A和洋艾内酯B纯度≥98％，手性试剂D-脯氨酰胺纯度≥99％。

甲醇为色谱纯，水为制水机生产的色谱用水。