[发明专利]河豚毒素制备及其纯化方法

权利要求书

1.一种河豚毒素的制备及纯化方法，其特征在于，所述方法包括：

通过多级发酵系统，制备产河豚毒素菌种的发酵液；

对所述发酵液进行固液分离处理；

过滤所述固液分离后获得的上清液，获得滤液；

重复浓缩和稀释所述滤液若干次，获得脱盐后的初浓缩液；

真空蒸发所述初浓缩液，获得终浓缩液；

在真空环境下，干燥所述终浓缩液以获得所述河豚毒素。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述通过多级发酵系统，制备产河豚毒素菌种的发酵液包括：

将所述产河豚毒素菌种接种到种子培养基中，制备获得种子液；

依次通过一级发酵罐、二级发酵罐和三级发酵罐分别进行第一级发酵、第二级发酵和第三级发酵；

在第三级发酵完毕后，从所述三级发酵罐输出所述发酵液。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述第一级发酵的时间为24-28小时，所述第二级发酵的时间为28-32小时，所述第三级发酵的时间为36-40小时。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对所述发酵液进行固液分离处理，具体包括：

将所述发酵液放入离心机中，以设定的离心力进行离心。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述过滤所述固液分离后获得的上清液，获得滤液，具体包括：

依次使用微滤膜和超滤膜对所述上清液进行过滤，获得所述滤液。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述微滤膜的孔径为0.1-0.2微米；所述超滤膜的截流分子量为1000-2000。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述重复浓缩和稀释所述滤液若干次，获得脱盐后的初浓缩液，具体包括：

S1、通过纳滤膜浓缩所述滤液；

S2、向所述浓缩后的滤液加入纯水进行稀释；

重复执行所述步骤S1和S2若干次，直至所述初浓缩液的导电率低于设定值。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，重复执行3-5次所述步骤S1和步骤S2，直至所述初浓缩液的导电率低于10μS/cm。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述纳滤膜的截留分子量为200-250；所述纯水的导电率低于0.1μS/cm。

10.一种河豚毒素，其特征在于，所述河豚毒素由如权利要求1-9任一项所述的河豚毒素的制备方法制备获得。