[发明专利]一种孕马血清促性腺激素粗品提取过程中悬浮液的固液分离方法

说明书

本发明的孕马血清促性腺激素粗品提取过程中悬浮液的固液分离方法。包括如下步骤：S1、取孕马血清，加偏磷酸溶液1调pH至3.0‑3.8，得偏磷酸/孕马血清混悬液；S2、将偏磷酸/孕马血清混悬液泵入板框压滤机中，板框压滤机装有经预处理的过滤纸板，固液分离后得到蛋白清液。步骤S2中过滤纸板的预处理包括以下步骤：将过滤纸板浸泡在0.05‑0.2％(m/v)的偏磷酸溶液2中50‑100min，沥干后装入板框压滤机。本发明采用板框压滤机代替传统的沉降式离心机，解决了孕马血清生产PMSG过程中“偏磷酸/孕马血清混悬液”大规模进行固液分离的瓶颈。具有劳动强度小、工作效率高、能量消耗少、PMSG收率和活性高等优点。

技术领域

本发明属于孕马血清促性腺激素粗品生产技术领域，具体涉及一种孕马血清促性腺激素粗品提取过程中悬浮液的固液分离方法。

背景技术

孕马血清促性腺激素(简称PMSG)是孕中母马尿囊绒毛膜细胞分泌的糖蛋白类促性腺激素。PMSG具有类似促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的双重活性，但以FSH的作用为主，具有明显的促卵泡发育作用；同时，也有一定的促排卵和黄体形成的功能，对雄性动物具有促使精细管发育和性细胞分化的功能。实践上，PMSG可以调控母畜同期发情，实现可控同步批次化生产，并缩短配种时间、降低不孕概率、提高繁殖效率。目前，PMSG已经广泛应用于动物的诱导发情、同期发情，超数排卵或增加排卵率；同时对卵巢发育不全或雄性生精能力衰退等也有良好的疗效。

PMSG生产的原料为采自于怀孕40-120天的母马血清，经典的提取方法是：首先用偏磷酸(HPO₃)与血清进行“偏磷酸-蛋白”反应，使血清中的杂蛋白沉淀，再进行固液分离得到清液；然后用乙醇与清液进行“乙醇-蛋白”分级，使血清中部分杂蛋白沉淀，再进行固液分离得到清液，最后用乙醇沉淀蛋白得到PMSG粗品。

小规模的PMSG生产过程中，固液分离方法都是采用沉降式离心分离法。由于“偏磷酸-蛋白”反应的混悬液含固量高达9％以上，实践中，如果使用管式离心机分离，由于其转鼓体积小，容固量有限，对于含固量高的物料，生产操作过程中需要频繁卸料和清洗，工作效率低下；另外由于血浆蛋白形成的混悬液中颗粒的特殊性，碟式离心机也无法解决“偏磷酸-蛋白”反应形成的混悬液的固液分离问题，所得“清液”仍然很混浊。且随着集约化、规模化的高效畜牧业的发展，市场对PMSG的需求量大幅提升，孕马血浆的日加工能力需要从100kg上升到2000kg，传统的沉降式离心方法已经不能满足血浆提取中的固液分离，寻求大规模固液分离方法及设备成为必然。

发明内容

本发明针对现有技术中PMSG制备过程中出现的问题，提供一种使用板框压滤机替代沉降离式离心机进行混悬液的大规模料液固液分离，解决了孕马血浆生产PMSG过程中进行固液分离的瓶颈，极大提高了工作效率、降低了能耗，同时节约了工艺时间，对保有PMSG的生物活性起到了积极的作用。

本发明的以上目的通过以下技术方案来实现：

一种孕马血清促性腺激素粗品提取过程中悬浮液的固液分离方法，包括如下步骤：

S1、取孕马血清，加偏磷酸溶液1调pH至3.0-3.8，得偏磷酸/蛋白混悬液；

S2、将偏磷酸/蛋白混悬液泵入板框压滤机中，板框压滤机装有经预处理的过滤纸板，固液分离后得到蛋白清液A；

作为优选，步骤S2中过滤纸板的预处理包括以下步骤：将过滤纸板浸泡在偏磷酸溶液2中50-100min，沥干后装入板框压滤机。

作为优选，所述偏磷酸溶液2的质量浓度为0.05-0.2％(m/v)。

作为优选，步骤S1中所述偏磷酸溶液1的质量浓度为2-8％(m/v)。

作为优选，加偏磷酸溶液1调pH至3.5。