[发明专利]一种微囊藻毒素降解菌及其应用

权利要求书

1.微小杆菌（Exiguobacteriumsp.）BIDE11，其保藏编号为：GDMCC No：60779。

2.权利要求1所述的微小杆菌（Exiguobacteriumsp.）BIDE11或其发酵产物在降解微囊藻毒素中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的发酵产物包括微小杆菌（Exiguobacteriumsp.）BIDE11的发酵液、发酵液浓缩产物、发酵液提取物中的至少一种。

4.一种降解微囊藻毒素的制剂，其特征在于，包含权利要求1所述的微小杆菌（Exiguobacteriumsp.）BIDE11和/或其发酵产物。

5.一种制备权利要求4所述的降解微囊藻毒素的制剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）将微小杆菌BIDE11接种到灭菌的EBB液体培养基中进行发酵，获得发酵液；

2）将发酵液离心，收集菌泥，用生理盐水再分散，超声破碎，超滤，取滤液；

3）往滤液中加入无水乙醇沉淀，过滤，收集沉淀物，得到菌体抽提物；

4）往菌体抽提物中加入保护剂，混匀，得到降解微囊藻毒素的制剂；

所述的EBB液体培养基组成为：MgSO₄·3H₂O 1.0 g、KH₂PO₄ 0.5 g、K₂HPO₄ 4.0 g、NaCl1.0 g、CaCl₂ 20 mg、FeSO₄ 5 mg、MnCl₂·4H₂O 5 mg、CuCl₂ 0.5 mg、葡萄糖 2 g、酵母提取物 0.15 g和去离子水 1000 mL。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）菌种活化：将微小杆菌BIDE11划线至EBB琼脂试管斜面培养基中，30℃培养24 h；然后转接到EBB液体培养基中，30℃培养20 h，形成摇瓶液体菌种；

2）扩大培养：将步骤1）得到的液体菌种以5% v/v的接种量转接到含有EBB液体培养基的30 L种子罐中，发酵温度30±1℃，搅拌速率100~120 rpm，通气量0.3 V/V•min，发酵时间为20 h，制成一级种子液；

3）二级扩大培养：将步骤2）得到的一级种子液以5% v/v的接种量转接到含有EBB液体培养基的300 L发酵罐中进行二级发酵，发酵温度30±1℃，搅拌速率100~120 rpm，通气量0.3V/V•min，发酵时间24 h；

4）收集发酵液，4000 RPM离心30 min，收集菌泥，用适量生理盐水再分散，超声破碎，超滤，取滤液，往滤液中加入无水乙醇沉淀，收集沉淀物，得到菌体抽提物；

5）往菌体抽提物中加入保护剂，混匀，得到降解微囊藻毒素的制剂；

所述的EBB液体培养基组成为：MgSO₄·3H₂O 1.0 g、KH₂PO₄ 0.5 g、K₂HPO₄ 4.0 g、NaCl1.0 g、CaCl₂ 20 mg、FeSO₄ 5 mg、MnCl₂·4H₂O 5 mg、CuCl₂ 0.5 mg、葡萄糖 2 g、酵母提取物 0.15 g和去离子水 1000 mL。

7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于，所述的滤液和无水乙醇按体积比2:1混合。

8.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于，所述的保护剂为谷胱甘肽。