[发明专利]用于治疗骨关节炎的间充质干细胞组合物及其用途

权利要求书

1.细胞治疗组合物在制备用于治疗骨关节炎和软骨缺损的药剂中的用途，所述细胞治疗组合物组成为：脐带间充质干细胞2×10⁷个/mL～5×10⁷个/mL、透明质酸或其药用盐3%～5%、氯化钠0.8%～1.0%、麦芽糖醇0.2%～0.5%、氯化镁0.05%～0.1%、乙二胺四乙酸钙钠0.02%～0.05%和注射用水，所述百分数为质量体积百分数。

2.根据权利要求1的用途，细胞治疗组合物中，所述透明质酸或其药用盐的质量体积百分数为3~4%。

3.根据权利要求1的用途，细胞治疗组合物中，所述间充质干细胞的密度为3×10⁷个/mL。

4.根据权利要求1的用途，细胞治疗组合物中，所述氯化钠的质量体积百分数为0.9%。

5.根据权利要求1的用途，细胞治疗组合物中，所述氯化镁的质量体积百分数为0.08%。

6.根据权利要求1的用途，细胞治疗组合物中，所述乙二胺四乙酸钙钠的质量体积百分数为0.03%。

7.根据权利要求1的用途，所述细胞治疗组合物组成为：脐带间充质干细胞4×10⁷个/mL、透明质酸钠4%、氯化钠0.9%、氯化镁0.08%、乙二胺四乙酸钙钠0.03%、麦芽糖醇0.4%和注射用水。

8.根据权利要求1的用途，所述细胞治疗组合物组成为：脐带间充质干细胞2×10⁷个/mL、透明质酸钠5%、氯化钠0.8%、氯化镁0.1%、乙二胺四乙酸钙钠0.02%、麦芽糖醇0.3%和注射用水。

9.根据权利要求1的用途，所述细胞治疗组合物组成为：脐带间充质干细胞5×10⁷个/mL、透明质酸钠3%、氯化钠1.0%、氯化镁0.05%、乙二胺四乙酸钙钠0.05%、麦芽糖醇0.5%和注射用水。

10.根据权利要求1的用途，所述细胞治疗组合物组成为：脐带间充质干细胞4×10⁷个/mL、透明质酸4%、氯化钠0.9%、氯化镁0.08%、乙二胺四乙酸钙钠0.04%、麦芽糖醇0.2%和注射用水。

11.根据权利要求1的用途，所述细胞治疗组合物组成为：脐带间充质干细胞4×10⁷个/mL、透明质酸钠4%、氯化钠0.9%、氯化镁0.07%、乙二胺四乙酸钙钠0.035%、麦芽糖醇0.4%和注射用水。

12.根据权利要求1的用途，所述细胞治疗组合物中，所述间充质干细胞为原代～第十代的间充质干细胞。

13.根据权利要求1的用途，所述细胞治疗组合物中，所述的脐带间充质干细胞的获取方法包括如下步骤：

(1)脐带组织贴壁处理：取细胞培养平皿，将组织块平铺于平皿中，每个平皿中的组织块数量维持在5-20块，使组织块风干2-50分钟直至组织贴在平皿上；

(2)脐带组织培养：沿平皿边缘慢慢加入间充质干细胞培养基至组织淹没即可；将平皿放进CO₂浓度为5%的37℃培养箱进行培养，培养至第3-7天时将平皿从培养箱取出，补加适量间充质干细胞培养基；在第9-11天时将平皿中的培养基移出，加入适量新鲜的间充质干细胞培养基，继续培养；在第11-13天时清除所有脐带组织块并继续培养；此后每1-3天进行一次全换液；

(3)细胞传代：当平皿内的贴壁细胞融合率达到50-70%时，使用消化酶TrypLE Express使贴壁细胞脱离平皿底部；离心，去除上清液，加入间充质干细胞培养基重新悬浮细胞，再接种于T25细胞培养瓶进行传代并进行扩增培养；此后每1-3天换液一次，直至融合率达到70-90%后，即得脐带间充质干细胞。