[发明专利]裸花紫珠中连翘脂苷B的制备方法及其应用

说明书

本发明涉及中药提取领域，具体涉及裸花紫珠中连翘脂苷B的制备方法，首次报道了从裸花紫珠中分离得到连翘脂苷B，该制备方法操作简单、成本低，并研究了连翘脂苷B的抗菌活性，明显抑制金黄色葡萄球菌、白色念珠菌，为裸花紫珠的进一步研究应用提供依据。

技术领域

本发明涉及中药提取领域，具体涉及裸花紫珠中连翘脂苷B的制备方法及其应用。

背景技术

世界卫生组织对中国妇女的调查表明：我国育龄女性中约41%的女性患有不同程度的妇科炎性疾病，已婚女性发病率更高达70%。据统计，宫颈炎约占妇产科门诊总数的40-50%，居妇科疾病之首，其中慢性宫颈炎占门诊病人的10%～25%。因此疗效确切的抗宫炎制剂的研制正是广大患者的迫切要求。

以裸花紫珠为主药的裸花紫珠栓、裸花紫珠片及裸花紫珠胶囊广泛应用于妇科疾病及皮肤科疾病的治疗上，效果显著，研究表明裸花紫珠提取物具有促进止血、抑制血栓形成、抑制细菌和细胞毒活性、 抵抗炎症、加强免疫等药理活性，有关裸花紫珠的化学成分鲜见报道，预实验结果表明有黄酮类、缩合鞣质、酚性化合物、糖类的化学反应，并以鞣质和黄酮苷元作为其理化鉴别的指标性成分。

连翘脂苷B具有抗菌、消炎功效，主要用于治疗风热感冒、痈肿疮毒、淋巴结结核、尿路感染等症状，现在还没有从裸花紫珠中提取出连翘脂苷B的相关报道，也没有关于连翘脂苷B属于裸花紫珠抗菌活性成分的研究。

发明内容

本发明的第一个目的是提供裸花紫珠中连翘脂苷B的制备方法，旨在从裸花紫珠中提取出连翘脂苷B，通过以下技术方案实现：

裸花紫珠中连翘脂苷B的制备方法，包括如下步骤：

（1）将裸花紫珠叶粉碎加入龙头瓶中，首次加入质量分数为90%的乙醇溶液，浸泡24h，收集萃取液同时用90%乙醇进行洗涤；

（2）将裸花紫珠叶粉末加入到90%乙醇，浸泡24h，洗涤后加入溶液A进行萃取，

获得裸花紫珠萃取液，将所述裸花紫珠萃取液浓缩至浸膏状，得到裸花紫珠提取物浸膏；

（3）将（2）中得到的裸花紫珠提取物浸膏混悬于水中，得到混悬液B，有机溶剂对所述混悬液B进行分级萃取，得到各级萃取液；

（4）将（3）中得到的末次萃取液加入至乙醇溶液中，得到混悬液C，加入硅胶至所述混悬液C，水浴加热，得到裸花紫珠粉末；

（5）柱层析法洗脱（4）中得到的裸花紫珠粉末，收集洗脱液，旋转蒸发，得到连翘脂苷B。

优选地，（1）将裸花紫珠叶粉碎加入龙头瓶中，首次加入4000-6000mL质量分数为90%的乙醇溶液，浸泡24h，收集萃取液同时用2500-5000mL 的90%乙醇进行洗涤；

（2）将裸花紫珠叶粉末加入到4000-6000ml 90%乙醇，浸泡24h，洗涤后陆续加入7000-9000mL的溶液A进行萃取，获得裸花紫珠萃取液，将所述裸花紫珠萃取液浓缩至浸膏状，得到裸花紫珠提取物浸膏；

（3）将（2）中得到的裸花紫珠提取物浸膏混悬于相当于其3-4倍体积量的水中，得到混悬液B，用2-3倍混悬液B体积的各级有机溶剂对所述混悬液B进行分级萃取，得到各级萃取液；

（4）将（3）中得到的末次萃取液加入至乙醇溶液中，得到混悬液C，加入硅胶至所述混悬液C，水浴加热，得到裸花紫珠粉末；

（5）柱层析法洗脱（4）中得到的裸花紫珠粉末，收集洗脱液，旋转蒸发，得到连翘脂苷B。

优选地，所述溶剂A为质量分数为90%的乙醇溶液。

优选地，有机溶剂D、有机溶剂E、有机溶剂F对所述混悬液B进行三级萃取，依次得到一级萃取液、二级萃取液、三级萃取液。