[发明专利]一种选择性酶促水解反应制备右旋异丁苯丙酸的方法

说明书

本发明公开了一种选择性酶促水解反应制备右旋异丁苯丙酸的方法，该方法包含：以异丁苯丙酸乙酯为原料、南极假丝酵母脂肪酶为生物催化剂、曲拉通和二氯甲烷为有机添加剂，pH 4～10的缓冲溶液为反应介质，20～30℃恒温振荡反应；反应结束后，经柱色谱分离得右旋异丁苯丙酸乙酯，再经稀硫酸催化水解得到右旋异丁苯丙酸。本发明的方法能够通过选择性酶促水解反应获得纯度较高的右旋异丁苯丙酸，且产物收率较高。

技术领域

本发明涉及一种制备右旋异丁苯丙酸的方法，具体涉及一种选择性酶促水解反应制备右旋异丁苯丙酸的方法。

背景技术

异丁苯丙酸是一种重要的非甾体抗炎药，从化学结构来看属于丙酸衍生物，其具有镇痛、退热等作用，可以缓解风湿性关节炎和骨关节炎引起的疼痛等。在结构上，异丁苯丙酸分子中存在一个手性中心，故具有一对对映体：右旋异丁苯丙酸和左旋异丁苯丙酸。

药理实验表明，异丁苯丙酸的药理活性主要由右旋异丁苯丙酸体现，而左旋异丁苯丙酸则可引起红疹、胃灼热、恶心呕吐等副作用。在临床上，使用右旋异丁苯丙酸不仅可降低诱发潜在毒性的可能性，而且可减少缓释剂、控释剂等制剂的使用。同时，右旋异丁苯丙酸进入体内后不需要转化过程，容易迅速获得足够高的血药浓度，具有起效快、作用强等特点。另外，右旋异丁苯丙酸还具有不干扰体内脂肪组织生物合成，排除诱发高敏性反应的可能等优点。所以对异丁苯丙酸进行手性拆分，在减少用药量和毒副作用等方面具有重要的意义。

目前，酶促拆分法因其对映体选择性好、反应条件温和、对环境友好等优点而备受关注，但是通过选择性水解反应进行异丁苯丙酸拆分的报道还很有限，并且拆分效果较差，右旋异丁苯丙酸的得率也较低。

发明内容

本发明的目的是提供一种选择性酶促水解反应制备右旋异丁苯丙酸的方法，该方法解决了现有方法中右旋异丁苯丙酸拆分效果差的问题，能够通过选择性酶促水解反应获得纯度较高的右旋异丁苯丙酸，且产物得率较高。

为了达到上述目的，本发明提供了一种选择性酶促水解反应制备右旋异丁苯丙酸的方法，该方法包含：以异丁苯丙酸乙酯为原料、南极假丝酵母脂肪酶为生物催化剂、曲拉通和二氯甲烷为有机添加剂，pH 4～10的缓冲溶液为反应介质，20～30℃恒温振荡反应；反应结束后，经柱色谱分离得右旋异丁苯丙酸乙酯，再经稀硫酸催化水解得到右旋异丁苯丙酸。其中，所述缓冲溶液为硼砂-硼酸缓冲溶液。

其中，所述二氯甲烷与异丁苯丙酸乙酯的用量比为500μL:1mmol。

优选地，所述异丁苯丙酸乙酯、南极假丝酵母脂肪酶、曲拉通的用量比为1mmol:50～200mg:800～1000mg。

优选地，所述振荡反应转速为150～250r/min。

优选地，所述反应时间不低于48h。

优选地，所述柱色谱采用高效液相色谱，以正己烷-异丙醇为流动相，色谱柱采用AD-H柱。

优选地，所述正己烷和异丙醇的体积比为99:1。

优选地，所述流动相的流速为1mL/min。

优选地，所述柱色谱的检测波长为225nm。

优选地，所述硼砂-硼酸缓冲溶液中，硼砂的浓度为0.05mol/L，硼酸的浓度为0.2mol/L。

本发明的选择性酶促水解反应制备右旋异丁苯丙酸的方法，解决了现有方法右旋异丁苯丙酸拆分效果差的问题，具有以下优点：

(1)本发明的方法，以异丁苯丙酸乙酯为原料，与南极假丝酵母脂肪酶和曲拉通在不同pH的缓冲溶液中振荡反应，并向其中加入少量二氯甲烷作为添加剂，此方法大大提高了通过酯的选择性水解反应进行异丁苯丙酸拆分的效果；