[发明专利]一种固态浓缩生长因子及其制备方法和应用

说明书

本发明公开一种固态浓缩生长因子及其制备方法和应用，包括以下步骤：将提取的凝胶状浓缩生长因子进行冷冻干燥或真空干燥即得本发明固态浓缩生长因子；本发明制备的固态浓缩生长因子含有大量三维矩阵网状结构的纤维蛋白，为多孔结构，与凝胶状浓缩生长因子相比，其储藏期更长，生物力学强度显著更佳，同时在促BMSCs增殖、分化、矿化能力上更佳，可单独作为植入材料用于骨缺损修复，且修复后伤椎的生物力学强度也显著增高；本发明固态浓缩生长因子的制备方法操作简单，可使用静脉血作为原料，制备材料的性能更佳，用途更广，具有广阔的临床应用前景和潜在的经济价值。

技术领域

本发明属于医学生物领域，具体涉及一种固态浓缩生长因子及其制备方法和应用。

背景技术

骨质疏松性椎体骨折(Osteoporotic vertebral fracture,OVF)是骨质疏松症(Osteoporosis,OP)的严重并发症之一，属于临床治疗难点。OVF发生后出现压缩嵌插改变，体位复位或手法复位遗留椎体内骨质缺损，从而容易出现骨折愈合不佳、椎体力学强度恢复不佳，导致疼痛不缓解、椎体进展性塌陷，严重时会导致脊髓神经受压损伤，因此，单纯镇痛、卧床、支具和手法复位等保守治疗在临床已无法完全满足治疗OVF的需求。促进骨折椎体早期愈合，维持脊柱正常力线，恢复其正常功能已经成为治疗OVF的新标准。

聚甲基丙烯酸甲酯(Polymethylmethacrylate,PMMA)是目前治疗OVF最常用的植入材料之一，尽管其能提供足够的支撑强度和黏固作用，但也存在一些明显的缺点：在体内不能被降解吸收，生物相容性差，无生物活性，弹性模量过大，聚合时释放大量的热，未聚合单体有毒等，导致了在临床应用时常常会发生一些严重的并发症。自体骨移植作为目前治疗骨缺损的金标准，吸收快，效果好，但其来源受限，取骨并发症多；异体骨、异种骨则因免疫排斥反应在临床应用受到限制，且其存在排异反应、交叉感染的风险。为了促进OVF愈合，寻找具有良好生物相容性并能提供足够支撑强度的生物材料是现阶段研究的热点。

浓缩生长因子(Concentrated Growth Factors,CGF)为第三代血浆提取物，其内含有大量生长因子，CGF促进骨再生及软组织修复是目前研究的热点和难点，动物实验中提取出CGF并运用于实验研究具有较大意义。目前CGF被广泛用于口腔医学种植牙领域，且有相关动物实验研究报道了其可促进大鼠颅骨缺损修复。

与PRF和PRP相比，CGF中血液中各种细胞成分能被分离的更加完全，纤维蛋白凝块不仅在体积、粘性和强度上更大，其中含有更高浓度的生长因子，如血小板衍生生长因子(Platelet-derived growth factor，PDGF)、转化生长因子-β(Transforming growthfactor-β,TGF-β)、胰岛素样生长因子(Insulin-like growth factor)、血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)和骨形态发生蛋白(Bonemorphogenetic protein,BMP)等生长因子，可促进骨组织或软组织的再生修复和血管生成；部分学者报道CGF在颅骨缺损模型中的修复作用，但目前对修复骨质疏松骨折骨缺损的研究目前尚未见报道。

目前国内外报道了从山羊、比格犬、兔子静脉及Vista大鼠心脏取血后进行离心制备CGF后进行实验，成本较高且取血难度较高，不便于掌握；提取后可于-4℃冰箱存储0～48小时，因此使用时一般需要现提现用。另外，在骨科中，通常是制备凝胶状CGF后剪成小块后与自体骨或异体骨混合植入骨缺损部位，目前尚缺乏其适合单独植入骨缺损区的CGF制品，因此CGF单独植入对骨缺损修复的作用未明确。另外，CGF凝胶单独运用但存在机械性能差、无法长期储存等问题，严重限制了其在临床上的应用。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的是提供一种操作简便、成本低、机械性能更佳，且适于临床应用，可作为治疗OVF的植入材料的浓缩生长因子。