[发明专利]一种西南远志茎段组培高成苗率培育方法

说明书

本发明公开了一种西南远志茎段组培高成苗率培育方法，包括如下步骤：热处理，外植体选择与处理，丛生芽诱导，丛生芽增殖，生根培养，瓶苗驯化，移栽。本发明的育苗方法可以利用尚未萌发腋芽的半木质化枝条切取的茎段这类微小器官培育成苗，可以快速选育出能保持母本原有的优良性状和纯度的西南远志优良株系，能有效提高西南远志的成苗率；本方法能获得健壮且性状稳定的试管苗，实现西南远志种苗的快速繁殖推广具有很大的开发应用价值。

技术领域

本发明涉及中药栽培技术领域，具体是指一种西南远志茎段组培高成苗率培育方法。

背景技术

西南远志，多年生草本，是云南佤族民间流传的一种珍贵中药，初步的药理实验结果表明西南远志具有抗疲劳，抗缺氧，抗低温和提高机体的抗应激能力，同时对预防和治疗高血压心脏病和心血管疾病等有功效。西南远志经济价值高，具有广阔的市场前景，因当地群众争相采挖导致资源处于濒危状态，急需进行规模化种植，为此需要有大量的苗木供应市场，但是不成熟的繁殖技术是西南远志推广及规模化种植的主要障碍。

目前现有的西南远志的繁殖方式主要有种子繁殖、扦插育苗和组织培养，种子繁殖为有性繁殖、后代性状不稳定，种子成熟期不一致，采收困难且萌芽率极低，扦插属无性繁殖、性状稳定，但繁殖系数低，速度慢，成本高，无法满足大规模的种植需求，现有组织培养技术尚处研究阶段，难以实现西南远志种苗的规模化生产。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服以上技术缺陷，提供一种西南远志茎段组培高成苗率培育方法，本发明的育苗方法可以利用尚未萌发腋芽的半木质化枝条切取的茎段这类微小器官培育成苗，可以快速选育出能保持母本原有的优良性状和纯度的西南远志优良株系，能有效提高西南远志的成苗率。

为了达到上述发明目的，本发明采用的技术方案为：一种西南远志茎段组培高成苗率培育方法，包括以下步骤，

(1)热处理：将生长健壮，无病虫害的西南远志盆栽置于培养箱内，设定光照16h/d、光强5000LX、空气湿度在50-70％，采取30-35℃的变温热处理20d以上；

(2)外植体的选择与处理：选取经过热处理的西南远志上新抽出的半木质化藤条，且带有尚未萌发的腋芽，去除叶片，切取至少带1个节间的茎段作为外植体，对其进行消毒；

(3)丛生芽诱导：用无菌镊子夹取步骤(2)中经消毒的无菌外植体，切取两端接触消毒剂的部分，留下1cm长具有1-2个节间的茎段，将其平放至培养基上，然后将操作完成的苗木放至培养间，设置温度25±2℃，无光照暗培养至茎段萌芽，时间为15天，待萌芽之后，温度不变，设置光强为3000XL，30天后生长出丛生芽，一个节间的茎段分化出10-20株的西南远志组培苗；

(4)丛生芽增殖：将诱导出来的丛生芽切成1cm长带有2-3个节间的茎段转接至培养基上，温度光强与丛生芽诱导相同，每瓶接种4-5根平放，培养30-45天，获得大量丛生苗，平均每个芽增殖10.5个；将增殖的丛生芽从基部切割分离成单芽，高度不超过3cm，基部以下部分继续放回瓶内，生成丛生芽，且增殖倍数不减；

(5)生根培养：将分离成单芽，高度不超过3cm的西南远志组培芽转入生根培养基中，设置温度25℃，光照强度2000LX，光照时长10h，培养30天，试管苗内基部长出白色根系，生根率平均达90％；

(6)瓶苗驯化：当瓶内西南远志组培苗根长1cm，根条数为2-3根时，将瓶苗移至炼苗大棚，在光强5000LX以上的强光下炼苗1-2星期，准备移栽；