[发明专利]一种检测降钙素原电化学发光传感器的制备方法

权利要求书

1.一种基于g-C₃N₄和CuO之间能量转移检测降钙素原电化学发光传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）用Al₂O₃抛光粉打磨直径为4 mm的玻碳电极，超纯水清洗干净，将6 µL、0.25~2.0 mgmL^-1 Au和碳纳米管修饰的g-C₃N₄复合材料g-C₃N₄-CNT@Au溶液滴加到电极表面，室温下晾干成膜；

（2）依次滴加6 µL、1~5 µg mL^-1的降钙素原捕获抗体，3 µL、质量分数为0.1%的BSA溶液到电极表面，超纯水洗净，室温下晾干；

（3）滴加6 µL、0.0001~10 ng mL^-1的一系列不同浓度的降钙素原抗原到电极表面，孵化2 h，超纯水冲洗，室温下晾干；

（4）滴加6 µL的聚多巴胺包裹的CuO负载降钙素原识别抗体的二抗标记物CuO@PDA-Ab₂溶液，超纯水冲洗，室温下晾干，制得一种电化学发光传感器。

2.如权利要求1所述的一种基于g-C₃N₄和CuO之间能量转移检测降钙素原电化学发光传感器的制备方法，其特征在于，所述的Au和碳纳米管修饰的g-C₃N₄复合材料g-C₃N₄-CNT-Au的制备步骤如下：

（1）碳纳米管修饰的g-C₃N₄复合材料g-C₃N₄-CNT的制备

将1 g三聚氰胺和2~100 mg的CNT充分研磨，然后放入带盖的陶瓷坩埚中，在马弗炉中550℃下加热4 h； 将得到的块状蓝灰色产物研磨成粉末，然后溶解于100 mL、5 moL L^-1HNO₃中超声3 h，在125℃下回流24 h，然后，将回流的产物离心并用超纯水洗涤直至pH接近7，将产物在55℃真空烘箱中干燥12 h，最后得到碳纳米管修饰的g-C₃N₄复合材料g-C₃N₄-CNT；

（2）Au和碳纳米管修饰的g-C₃N₄复合材料g-C₃N₄-CNT@Au制备

将30 mg 碳纳米管修饰的g-C₃N₄复合材料g-C₃N₄-CNT分散在20 mL超纯水中，然后将1.5mL 2% HAuCl₄和5 mg聚乙烯吡咯烷酮PVPK30加入上述溶液中搅拌5 h； 随后，逐滴加入2mL、50 mmoL L^-1柠檬酸钠和少量NaBH₄以还原HAuCl₄，在黑暗中搅拌12 h后，用超纯水洗涤上述溶液以分离未结合的金纳米颗粒； 最后，将产物在55℃真空干燥箱中干燥12 h得到Au和碳纳米管修饰的g-C₃N₄复合材料g-C₃N₄-CNT@Au。