[发明专利]一种体外形成早期微毛囊的培养方法及其应用有效
申请号: | 201911171516.1 | 申请日: | 2019-11-21 |
公开(公告)号: | CN110804580B | 公开(公告)日: | 2021-09-28 |
发明(设计)人: | 吴训伟;温洁;刘畅;张群;白福响;冷雪 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12Q1/02;G01N33/50 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 郑平 |
地址: | 250012 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 体外 形成 早期 毛囊 培养 方法 及其 应用 | ||
1.一种体外形成早期微毛囊的培养方法,其特征在于,所述培养方法包括:
将真皮祖细胞与表皮干细胞混合,使用培养基悬浮培养,形成真皮-表皮聚集物,收集培养后的毛囊样结构即为培养的毛囊样微器官;
其中,所述培养基的配方包括以下组分:DMEM/F12(3:1)培养基、0.05~0.2%青霉素/链霉素、1~10 ng/ml FGF2、1~10 ng/ml EGF、0.1~2%B27、0.5~5mg/ml BPE和1~5% FBS;
所述培养条件具体为:在37℃、含5%CO2的组织培养箱中进行培养,每两天更换一次培养基,培养时间为4~72小时。
2.如权利要求1所述的培养方法,其特征在于,所述培养基的配方包括以下组分:DMEM/F12(3:1)培养基、0.1%青霉素/链霉素、5 ng/ml FGF2、5 ng/ml EGF、1%B27、1mg/ml BPE和2% FBS。
3.如权利要求1所述的培养方法,其特征在于,所述真皮祖细胞来源于头皮。
4.如权利要求1所述的培养方法,其特征在于,所述表皮干细胞选自来源于任何部位的皮肤。
5.如权利要求1所述的培养方法,其特征在于,所述表皮干细胞选自包皮。
6.如权利要求1所述的培养方法,其特征在于,所述真皮祖细胞与表皮干细胞混合比例为0.5~5:1。
7.如权利要求1所述的培养方法,其特征在于,所述培养时间为24~48小时。
8.权利要求1-7任一项所述培养方法获得的早期微毛囊。
9.权利要求8所述早期微毛囊的应用,其特征在于,所述应用为如下a)-c)中的任意一种或多种:
a)毛囊上皮-间质相互作用研究;
b)对毛发干细胞的毛发生成潜能的评估;
c)促毛发再生的化合物筛选。
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