[发明专利]蜕膜NK细胞及其细胞亚群在制备不孕不育相关疾病治疗药物中的用途

说明书

本发明提供了蜕膜NK细胞及其细胞亚群在制备不孕不育相关疾病治疗药物中的用途。通过实验证实，该蜕膜NK细胞及其细胞亚群通过促进子宫内膜厚度增加、增强子宫内膜细胞活力、降低内膜细胞损伤、促进VEGF表达、维持子宫内膜基质细胞干性和刺激增殖的方式治疗子宫内膜生长障碍性疾病，使得子宫内膜损伤模型小鼠的受孕成功率由30％提高至60～70％；通过发挥免疫耐受性作用、降低自发性流产率以及提高T辅助淋巴细胞水平治疗母胎免疫耐受障碍相关性疾病，为不孕不育的治疗提供了一种新的途径。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及蜕膜NK细胞及其细胞亚群在制备不孕不育相关疾病治疗药物中的用途、细胞的分离培养方法以及含有其的药物组合物。

背景技术

子宫内膜损伤主要为内膜基底层的损伤，其主要原因与妊娠期刮宫有关，与正常子宫内膜相比，妊娠期子宫内膜基底层疏松，更容易受到损伤。基于我国国情以及人工流产率逐渐增加的现状，子宫内膜受损的发生情况不容忽视。子宫内膜基底层受损，可能导致子宫内膜干细胞受损或缺失；与此同时，损伤内膜局部的感染和无菌性炎症会破坏干细胞的壁龛微环境，造成上皮和间质细胞再生修复发生障碍，血管形成受阻，致密纤维组织形成，最终导致宫腔仅覆盖少量内膜，甚至无内膜，腺体萎缩，宫腔失去正常形态及功能。进一步的，宫腔内的免疫情况紊乱进一步介导子宫内膜免疫性流产的风险。

NK细胞是存在子宫内膜一种固有免疫细胞。在妊娠早期，NK细胞占蜕膜中淋巴细胞总数的40-70％，是正常蜕膜中含量较高的一类的淋巴细胞。现代生殖医学研究认为，人类蜕膜NK(dNK)细胞具有独特的CD56^brightCD16^-KIR⁺CD9⁺CD49a⁺表型，与外周NK细胞不同，几乎没有细胞毒性。蜕膜NK细胞在蜕膜组织局部的参与促进新生血管生成、组织重塑、免疫调节和胎盘形成。

根据现有探究，未公开或提示利用蜕膜NK细胞制备产品以用于疾病的治疗的技术方案，这是未知的和需要证实的。另一方面，蜕膜NK细胞群本身是具有极强的异质性的，即具有CD56^brightCD16^-KIR⁺CD9⁺CD49a⁺表型的蜕膜组织内NK细胞还可以根据其表面标志物的表达不同分为多群，且功能各异。现有技术没有公开或提示表达特异性标志物的蜕膜NK细胞亚群制备产品用于疾病治疗的技术方案。

发明内容

本发明是为解决上述技术问题进行的，目的在于提供一种NK细胞及其细胞亚群的用途、制备方法以及含有其的药物组合物。

本发明的第一方面在于提供蜕膜NK细胞及其细胞亚群在制备不孕不育相关疾病治疗药物中的用途。

本发明所述的蜕膜NK细胞，指的是表面标志物为CD56^brightCD16^-KIR⁺CD9⁺CD49a⁺表型的蜕膜组织内NK细胞。蜕膜NK细胞亚群，指在上述NK细胞特征基础上，进一步通过细胞标志物CD39⁺，CD27⁺，CD160⁺或TIGIT⁺进行筛选得到的；蜕膜NK细胞亚群包括标志物为CD39⁺，CD27⁺，CD160⁺或TIGIT⁺的蜕膜NK亚细胞中的任意一种或多种的组合。

本发明所述的不孕不育相关疾病包括子宫内膜生长障碍性疾病以及母胎免疫耐受障碍相关性疾病两类。子宫内膜生长障碍相关疾病包括子宫内膜损伤、卵巢早衰、性激素紊乱、多囊卵巢综合症、盆腔炎性疾病、子宫内膜容受性下降、子宫内膜炎、内膜息肉、宫腔粘连、子宫内膜腺体减少、内膜性纤维化、闭经、异常性子宫出血、子宫腺肌症和子宫内膜异位症、生殖系统感染、子宫肌瘤等；母胎免疫耐受障碍相关性疾病包括反复性自发流产、先兆流产或辅助生殖技术治疗失败等。