[发明专利]一种巯基化透明质酸及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种巯基化透明质酸，其特征是：其是将透明质酸或其盐的部分羟基替换为含有巯基的酯基而得；优选的，巯基的取代度为10%-40%，所述巯基的取代度指的是巯基摩尔数与透明质酸双糖单元摩尔数的比值。

2.根据权利要求1所述的巯基化透明质酸，其特征是：所述含有巯基的酯基的结构式为，M为C1-C6的亚烷基，优选的，所述含有巯基的酯基为、或；优选的，所述巯基化透明质酸是将平均分子量为200 ~2000 kDa的透明质酸或其盐的部分羟基替换为含有巯基的酯基而得；优选的，每个重复单元最多只有一个羟基被取代，被取代的羟基位于N-乙酰葡糖胺上。

3.一种巯基化透明质酸的制备方法，其特征是：包括a）将透明质酸或其盐中的羟基与含羧基的二硫化合物中的羧基进行酯化反应，以及b）将连接到透明质酸或其盐上的二硫键还原为巯基的步骤；优选的，在透明质酸或其盐与含羧基的二硫化合物反应前，还包括将透明质酸或其盐与四丁基氢氧化铵反应形成透明质酸四丁基铵盐的步骤，然后将透明质酸四丁基铵盐与含羧基的二硫化合物进行反应。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征是：透明质酸或其盐的平均分子量为200 ~2000 kDa；优选的，所述含羧基的二硫化合物为3,3’-二硫代二丙酸、2,2’-二硫代二乙酸或4,4’-二硫代二丁酸。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征是：透明质酸或其盐与四丁基氢氧化铵反应的步骤为：将透明质酸或其盐悬浮于有机溶剂水溶液中，加酸调整pH至酸性，使透明质酸或其盐转化为酸型透明质酸，过滤，将滤饼用水溶解，然后加入四丁基氢氧化铵进行反应，反应后冷冻干燥，得透明质酸四丁基铵盐。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征是：透明质酸或其盐与四丁基氢氧化铵反应时，加酸至pH≤4，优选pH为2-4；

优选的，透明质酸或其盐与四丁基氢氧化铵反应时，所述有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇和丙酮中的一种或多种，有机溶剂水溶液的浓度为60-90wt%；

优选的，透明质酸或其盐与四丁基氢氧化铵反应时，透明质酸或其盐与有机溶剂水溶液的用量关系为1g:10~50mL；

优选的，透明质酸或其盐与四丁基氢氧化铵反应时，加入四丁基氢氧化铵至溶液pH为6.5~8.0。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征是：透明质酸或其盐或者透明质酸四丁基铵盐与含羧基的二硫化合物的酯化反应在催化剂存在下进行，所述催化剂为二碳酸二叔丁酯和成分A的混合物，所述成分A为4-二甲氨基吡啶、四甲基乙二胺或N,N’-羰基二咪唑，优选的，成分A与二碳酸二叔丁酯比值为0.15~1.5g:1mL；

优选的，透明质酸或其盐或者透明质酸四丁基铵盐与含羧基的二硫化合物的酯化反应在非质子溶剂存在下进行，更优选的，所述非质子溶剂为二甲基亚砜或N,N-二甲基甲酰胺；

优选的，透明质酸或其盐或者透明质酸四丁基铵盐与含羧基的二硫化合物的质量比为1:1.6~5.0；

优选的，透明质酸或其盐或者透明质酸四丁基铵盐在非质子溶剂中的浓度为0.5~2.0wt%；

优选的，催化剂与透明质酸或其盐或透明质酸四丁基铵盐的质量比为0.5～1.5:1；

优选的，酯化反应的温度为40-50℃。

8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征是：连接到透明质酸或其盐上的二硫键在还原剂存在下还原为巯基；

优选的，所述还原剂为二硫代苏糖醇、三(2-羰基乙基)磷盐酸盐、还原型谷胱甘肽和2-巯基乙醇中的一种或多种；

优选的，还原反应的反应体系的pH为7.0-9.0；

优选的，还原剂与透明质酸或其盐或者透明质酸四丁基铵盐的摩尔比为1.2～2.5:1，透明质酸或其盐或者透明质酸四丁基铵盐的摩尔数以透明质酸双糖单元的摩尔数计；

优选的，还原反应在水中进行，水的用量为透明质酸或其盐的二硫化合物的质量的50~70倍。