[发明专利]一种提高甾药生产菌株活力的甾药前体发酵生产方法

权利要求书

1.一种提高甾药生产菌株活力的甾药前体发酵生产方法，其特征在于，步骤为：

(1)称取适量的大米放入筛中用蒸馏水冲洗干净，并沥干，随后倒入专用的盛放盆中；

(2)向步骤1中的成放盆中添加营养液并进行搅拌来调节PH值，营养液和大米的质量比为1：3，搅拌时间控制在10-20min,获得第一混合物；

(3)对步骤2中的第一混合物进行分装，将第一混合物分别装入若干个摇瓶中；

(4)步骤3中分装完成的摇瓶放入灭菌装置中进行灭菌；

(5)将步骤4中灭菌完成后的摇瓶取出，然后将每个摇瓶中加入适量的孢子悬液，随后将所有的摇瓶放入摇床中进行培养，培养温度控制在25-28℃，摇床的震荡速度控制在90-120rpm，培养时间控制在20-37h；

(6)将步骤5中摇瓶内培养完成的孢子取出后，进行真空干燥，随后将菌种利用砂土管法进行保存，保存环境的温度控制在0-4℃；

(7)将步骤6中保存的菌种取出后，按照5-10％的接种量将菌种接种到装有培养基的1000L种子发酵罐，pH值控制在6.3-6.7当pH高于最适pH时，通过添加适量硫酸铵降低pH，当pH低于最适pH时，通过补加氨水升高pH值，培养时间控制在20-25h，温度控制在29-32℃；

(8)按照20-30％的接种量将1000L种子发酵罐的菌种接种到装有培养基的8000L种子发酵罐，pH值控制在6.8-7.3，当pH高于最适pH时，通过添加适量硫酸铵降低pH，当pH低于最适pH时，通过补加氨水升高pH值，在0-45h内维持温度在25℃，然后恒速降温至20℃，并维持175h，最后20h内回复到25℃进行培养。

2.根据权利要求1的一种提高甾药生产菌株活力的甾药前体发酵生产方法，其特征在于，步骤1中的米选用优品质新米。

3.根据权利要求1的一种提高甾药生产菌株活力的甾药前体发酵生产方法，其特征在于，步骤3中的摇瓶选用容量为250ml的摇瓶，其中每个摇瓶中的第一混合物的体积与摇瓶容量的百分比为16-20％。

4.根据权利要求1的一种提高甾药生产菌株活力的甾药前体发酵生产方法，其特征在于，步骤4中的灭菌方式为辐照灭菌。

5.根据权利要求1的一种提高甾药生产菌株活力的甾药前体发酵生产方法，其特征在于，步骤7中1000L发酵罐培养基配方为：麦芽糖130-140g/L、硝酸盐2.8-3.2g/L、磷酸盐3.1-4.0g/L等。

6.根据权利要求1的一种提高甾药生产菌株活力的甾药前体发酵生产方法，其特征在于，步骤8中其中8000L发酵罐培养基配方为：麦芽糖130-140g/L、硝酸盐2.8-3.2g/L、磷酸盐1.0-1.2g/L等。