[发明专利]一种长效稳定表达的杆状病毒载体及其构建方法在审
| 申请号： | 201911183740.2 | 申请日： | 2019-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN110747232A | 公开（公告）日： | 2020-02-04 |
| 发明（设计）人： | 王志昇;杨萌萌;李梦婷;姬勇敢;杨文;陈健茂 | 申请（专利权）人： | 宁夏医科大学 |
| 主分类号： | C12N15/866 | 分类号： | C12N15/866;C12N15/66;C12N7/01;A61K48/00 |
| 代理公司： | 11463 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人： | 刘兰 |
| 地址： | 750000 宁夏回族自治区银川市*** | 国省代码： | 宁夏;64 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 构建 重组杆状病毒表达 重组杆状病毒载体 加速因子 转座子 衰减 哺乳动物细胞 杆状病毒载体 荷瘤小鼠 基因克隆 内皮抑素 融合蛋白 体内表达 外源蛋白 稳定表达 血管抑素 血清补体 荧光蛋白 转座系统 存活率 荧光 小鼠 抵抗 攻击 基因 观察 表现 | ||
1.一种重组杆状病毒载体，其特征在于，所述重组杆状病毒载体包含SB转座子和编码衰减加速因子(DAF)的基因。
2.根据权利要求1所述的重组杆状病毒载体，其特征在于，所述重组杆状病毒载体还包含编码标签蛋白的基因；优选地，所述标签蛋白选自荧光蛋白、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)、6×His标签、麦芽糖结合蛋白(MBP)、Flag标签蛋白(DYKDDDDK)、SUMO标签蛋白和C-Myc标签蛋白；更优选地，所述标签蛋白选自绿色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白、蓝绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白和黄色荧光蛋白。
3.根据权利要求1或2所述的重组杆状病毒载体，其特征在于，所述重组杆状病毒载体还包含外源基因。
4.根据权利要求4所述的重组杆状病毒载体，其特征在于，所述外源基因为内皮抑素(Endostatin)基因和/或血管抑素(angiostatin)基因；优选地，所述外源基因为包含人内皮抑素(Endostatin)和血管抑素(angiostatin)的融合基因(hEA)。
5.一种重组杆状病毒载体的构建方法，其特征在于，所述方法包含将SB转座子和编码衰减加速因子(DAF)的基因克隆至杆状病毒载体的步骤。
6.根据权利要求5所述的重组杆状病毒载体的构建方法，其特征在于，所述方法还包含将编码标签蛋白的基因克隆至杆状病毒载体的步骤；优选地，所述标签蛋白选自荧光蛋白、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)、6×His标签、麦芽糖结合蛋白(MBP)、Flag标签蛋白(DYKDDDDK)、SUMO标签蛋白和C-Myc标签蛋白；更优选地，所述标签蛋白选自绿色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白、蓝绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白和黄色荧光蛋白。
7.根据权利要求5或6所述的重组杆状病毒载体的构建方法，其特征在于，所述方法还包含将外源基因克隆至杆状病毒载体的步骤。
8.根据权利要求7所述的重组杆状病毒载体的构建方法，其特征在于，所述外源基因为内皮抑素(Endostatin)基因和/或血管抑素(angiostatin)基因；优选地，所述外源基因为包含人内皮抑素(Endostatin)和血管抑素(angiostatin)的融合基因(hEA)。
9.一种细胞或病毒，其特征在于，所述细胞含有如权利要求1-4任一项所述的重组杆状病毒载体；所述病毒由权利要求1-4任一项所述的重组杆状病毒载体制得。
10.如权利要求1-4任一项所述的重组杆状病毒载体或者如权利要求9所述的细胞或病毒在制备重组蛋白、重组多肽或者基因治疗药物中的应用；优选地，所述重组蛋白或重组多肽为药物蛋白或药物多肽。
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