[发明专利]一种ω-转氨酶突变体及其在生产手性芳香胺中的应用有效
申请号: | 201911184112.6 | 申请日: | 2019-11-27 |
公开(公告)号: | CN110747181B | 公开(公告)日: | 2021-05-28 |
发明(设计)人: | 倪晔;曹旭东;方红辉;韩瑞枝;许国超;龚磊 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/00;C12R1/19 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 林娟 |
地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 转氨酶 突变体 及其 生产 手性 芳香 中的 应用 | ||
1.一种ω-转氨酶突变体,其特征在于,所述ω-转氨酶突变体是通过将出发氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的ω-转氨酶的第136位甘氨酸突变为异亮氨酸、第155位谷氨酰胺突变为亮氨酸、第225位苯丙氨酸突变为甲硫氨酸、第281位半胱氨酸突变为异亮氨酸和/或第283酪氨酸突变为脯氨酸得到的。
2.编码权利要求1所述ω-转氨酶突变体的基因。
3.携带权利要求2所述基因的重组质粒。
4.如权利要求3所述的重组质粒,其特征在于,所述重组质粒的载体为pET-28a(+)质粒或pET-20b(+)质粒。
5.携带权利要求2所述基因或权利要求3或4所述重组质粒的宿主细胞。
6.如权利要求5所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为细菌或真菌。
7.权利要求1所述ω-转氨酶突变体的制备方法,其特征在于,所述方法为将权利要求5或6所述的宿主细胞接种至发酵培养基中进行发酵,获得发酵液;将发酵液进行离心,收集菌体;将菌体进行破碎后离心,获得细胞破碎上清液;将细胞破碎上清液进行提取,获得权利要求1所述的ω-转氨酶突变体。
8.一种生产手性芳香胺的方法,其特征在于,所述方法为将权利要求1所述的ω-转氨酶突变体添加至含有前手性芳香酮的反应体系中进行反应,得到反应液;将反应液进行提取,获得手性芳香胺。
9.权利要求1所述ω-转氨酶突变体、 权利要求2所述基因、 权利要求3或4所述重组质粒、 权利要求5或6所述宿主细胞、 权利要求7所述制备方法或权利要求8所述方法在生产手性芳香胺中的应用。
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