[发明专利]一种3D细胞培养基质及其制备方法

权利要求书

1.一种3D细胞培养基质的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

(1)制备氧化海藻酸钠：向海藻酸钠中加入其质量50-80％的高碘酸钠溶液，避光搅拌反应 24h，再加入与高碘酸钠等摩尔量的乙二醇终止反应，再进行不低于 24 小时的透析处理，且每4h 进行一次换水，经冻干后得到氧化度为 50％-80％的氧化海藻酸钠；

(2)制备混合海藻酸钠溶液：将氧化海藻酸与海藻酸钠按质量比为(3-2):(2-3)混合，并用蒸馏水配置成1％-4％的混合海藻酸钠溶液；

(3)制备无菌氯化钙溶液：用蒸馏水配置成质量分数为1.2％的无菌氯化钙溶液；

(4)制备无菌混合海藻酸钠溶液：在无菌环境下，将混合海藻酸钠溶液与无菌氯化钙溶液移至细胞间，再使用孔径为 0.22μm 的细胞滤器过滤，得无菌混合海藻酸钠溶液和氯化钙溶液；

(5)制备海藻酸钠培养溶液：向无菌混合海藻酸钠溶液中依次加入浓缩培养基、血清，并将其混匀，得海藻酸钠培养溶液；其中血清的添加量按1％-10％的比例添加；

(6)制备 3D 细胞培养基质：将无菌氯化钙溶液与海藻酸钠培养溶液混合溶液交联，即得 3D 细胞培养基质。

2.根据权利要求 1 所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)所述浓缩培养基为 10-100倍浓缩。

3.一种根据权利要求 1或 2所述任一制备方法制得的3D细胞培养基质。

4.一种采用权利要求3所述3D细胞培养基质在培养3D细胞中的应用，其特征在于，先将所需培养的细胞按10⁴～10⁷个/ml浓度加入海藻酸钠培养溶液中，混匀后再加入无菌氯化钙溶液进行交联，即可进行细胞的3D培养。