[发明专利]一种靶向程序性死亡受体1和PD-1配体1相互作用界面的抗原肽和纳米抗体

说明书

本发明公开了一种靶向程序性死亡受体1和PD‑1配体1相互作用界面的抗原肽和纳米抗体，所示抗原肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，所示纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明构建了一种以PD‑1/PD‑L1相互作用界面的β环序列PD‑1125‑136为抗原肽序列筛选的靶向PD‑1/PD‑L1的相互作用界面的纳米抗体。此纳米抗体可显著抑制PD‑1与靶细胞表面的结合，在研发靶向PD‑1/PD‑L1治疗性纳米抗体方面具有重要应用价值。因此，此抗原肽和纳米抗体有很好的研究和应用推广价值。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，更具体地，涉及一种靶向程序性死亡受体1和PD-1配体1相互作用界面的抗原肽和纳米抗体。

背景技术

PD-1/PD-L1免疫疗法，是目前除了常见的治疗手段如手术、放化疗和靶向药治疗等之外的最新的治疗方法。PD-1全称是程序性死亡受体1，英文名字为prog rammed death1，是一种重要的免疫抑制分子，为CD28超家族成员。PD-L1全称是程序性死亡受体-配体1，英文名字programmed cell death-Ligand 1，是大小为40kDa的第一型跨膜蛋白。

T细胞有“人体卫士”之称，可以识别人体的肿瘤细胞并进行杀伤攻击。但是肿瘤细胞是比较狡猾的，它看到T细胞上有个蛋白叫做PD-1，然后肿瘤细胞便伸出一个PD-L1蛋白(是PD-1的配体)，当两个小手(PD-1与PD-L1)结合后，便提供了抑制性信号，诱导了T细胞凋亡、抑制T细胞的活化和增殖。

PD-L1蛋白是PD-1的配体，与免疫系统的抑制有关，可以传导抑制性的信号。PD-1和PD-L1一旦结合便会向T细胞传递一种负向调控信号，诱导T细胞进入静息状态，减低淋巴结CD8+T细胞的增生，让其无法识别癌细胞，并且使T细胞自身增殖减少或凋亡，有效解除机体的免疫反应，因此癌细胞可以肆无忌惮地生长了。PD-1/PD-L1免疫治疗法通过把其中一个通路的限制，使得PD-1与PD-L1不能结合，免疫系统恢复正常工作，从而能够攻击肿瘤细胞，控制肿瘤。

靶向PD-1/PD-L1通路的免疫疗法是一种较广谱的抗肿瘤方法，已被用于多种类型的肿瘤疾病的治疗，可有效改善患者的总生存期。但已有的临床使用数据显示，PD-1/PD-L1疗法的个体差异很大，部分患者有显著的效果，部分患者却无效。如黑色素瘤的有效率可达40-50％，膀胱癌可达50％，肺癌有效率可达30％，胃癌、食管癌和肝癌的有效率约在30％。研究结果表明，PD-1/PD-L1免疫治疗的高反应性跟CD8+T细胞效应基因的表达、肿瘤突变负荷、高新抗原负荷相关；低反应性与PD-1/PD-L1信号通路的抑制效率有关，PD-1/PD-L1信号通路活性的抑制率越低，肿瘤病人的反应性就越低。PD-1/PD-L1信号通路活性的抑制率与所用抑制剂(主要是抗体)的靶向部位密切相关，目前已有抗体的靶向部位均不在PD-1和PD-L1相互作用的界面区。而靶向PD-1和PD-L1相互作用的界面区的抗体将显著提高对该信号通路活性的抑制率。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种靶向程序性死亡受体1和PD-1配体1相互作用界面的抗原肽和纳米抗体。

本发明的第一个目的是提供一种PD-1与PD-L1相互作用界面的抗原肽。

本发明的第二个目的是提供所述的抗原肽在筛选靶向PD-1与PD-L1的相互作用界面的抗体中的应用。

本发明的第三个目的是提供一种靶向PD-1与PD-L1的相互作用界面的纳米抗体。

本发明的第四个目的是提供一种靶向PD-1与PD-L1的相互作用界面的纳米抗体的编码基因。

本发明的第五个目的是提供一种重组载体。

本发明的第六个目的是提供一种工程菌。