[发明专利]一种H13N8重组流感病毒及应用在审

专利信息
申请号: 201911195864.2 申请日: 2019-11-29
公开(公告)号: CN110760486A 公开(公告)日: 2020-02-07
发明(设计)人: 于志君;朱彤;吴家强;陈为京;高月花 申请(专利权)人: 山东省农业科学院家禽研究所
主分类号: C12N7/01 分类号: C12N7/01;C12N15/85;G01N33/68;A61K39/145;A61P31/16
代理公司: 37221 济南圣达知识产权代理有限公司 代理人: 张晓鹏
地址: 250023 *** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 重组流感病毒 亚型流感病毒 感染性克隆质粒 细胞悬液接种 血凝抑制效价 感染性克隆 鸡胚尿囊液 表达载体 基因合成 抗原基因 流感疫苗 灭活疫苗 内部基因 皮下注射 同源重组 共转染 鸡血清 免疫组 构建 颈部 血凝 转染 合成 细胞 基因 收获 应用
【权利要求书】:

1.一种H13N8重组流感病毒,其特征在于,所述重组流感病毒以鸡胚适应株PR8病毒内部基因为骨架,以H13N8亚型流感病毒的HA和NA基因为抗原;所述PR8病毒内部基因为PB2、PB1、PA、NP、M和NS基因。

2.如权利要求1所述H13N8重组流感病毒,其特征在于,所述PB2蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示;

或所述PB1基因序列如SEQ ID NO:2所示;

或所述PA基因序列如SEQ ID NO:3所示;

或所述NP基因序列如SEQ ID NO:4所示;

或所述M基因序列如SEQ ID NO:5所示;

或所述NS基因序列如SEQ ID NO:6所示;

或所述HA基因序列如SEQ ID NO:7所示;

或所述NA基因序列如SEQ ID NO8所示。

3.一种H13N8重组流感病毒的制备方法,其特征在于,将PR8病毒的PB2、PB1、PA、NP、M和NS基因与H13N8的HA和NA基因共同导入宿主细胞中培养获得所述H13N8重组流感病毒。

4.如权利要求3所述H13N8重组流感病毒的制备方法,其特征在于,所述PR8病毒的PB2、PB1、PA、NP、M和NS基因与H13N8的HA和NA基因是通过含有PB2基因的重组载体、含有PB1基因的重组载体、含有PA基因的重组载体、含有NP基因的重组载体、含有M基因的重组载体、含有NS基因的重组载体、含有HA基因的重组载体、含有NA基因的重组载体共同导入宿主细胞中。

5.如权利要求4所述H13N8重组流感病毒的制备方法,其特征在于,所述重组载体的表达载体为pFluDD,所述载体由pUC18载体(Thermo Fisher Scientific公司)改造而成,具体是将CMV启动子、鼠RNA聚合酶I终止子、人RNA聚合酶I启动子和SV40多聚腺苷酸化信号依次插入到pUC18载体上构建获得。

6.如权利要求3所述H13N8重组流感病毒的制备方法,其特征在于,所述宿主细胞为293T细胞、COS7细胞、MDCK细胞、VERO细胞、HL-8细胞中的一种或多种,优选为293T细胞。

7.权利要求1或2所述H13N8重组流感病毒在制备临床检查和/或评估流感疫苗产品中的应用。

8.如权利要求7所述H13N8重组流感病毒在制备临床检查和/或评估流感疫苗产品中的应用,其特征在于,所述流感疫苗为H13N8病毒疫苗。

9.一种疫苗,其特征在于,所述疫苗为权利要求1或2所述H13N8重组流感病毒的灭活制剂。

10.如权利要求9所述疫苗,其特征在于,所述疫苗中还包括冻干保护剂及稳定剂。

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