[发明专利]一种降解玉米秸秆的方法

权利要求书

1.一种降解玉米秸秆的方法，其特征在于：具体是将玉米秸秆机械粉碎、过筛、烘干后，用以Cu²⁺修饰的Fe₃O₄-NH₂-PEI磁性纳米粒子作为载体的固定化漆酶对玉米秸秆中的木质素进行降解，然后回收固定化漆酶，将降解木质素后的玉米秸秆煮沸后20～30min加入0.1%的NaOH进行洗涤，再加入纤维素酶进一步降解纤维素，所述用固定化漆酶对玉米秸秆中的木质素进行降解具体是将固定化漆酶、玉米秸秆和pH为4.6的NaAC-HAC缓冲液在35℃下以160转/min的振荡速率进行振荡处理12～72h，其中，固定化漆酶的添加量为10～60 U g^-1，玉米秸秆与NaAC-HAC缓冲液的质量体积比为1g：200μL。

2.如权利要求1所述的一种降解玉米秸秆的方法，其特征在于：所述固定化漆酶是以Cu²⁺修饰的Fe₃O₄-NH₂-PEI磁性纳米粒子作为载体，具体是将Cu²⁺修饰的Fe₃O₄-NH₂-PEI磁性纳米粒子溶解于含有漆酶的缓冲溶液中，在25℃下以150转/min的速率振荡处理40-70min；反应后将制得的Cu²⁺修饰的Fe₃O₄-NH₂-PEI漆酶磁性纳米颗粒和上清液分离；用超纯水对Cu²⁺修饰的Fe₃O₄-NH₂-PEI漆酶磁性纳米颗粒连续洗涤，直到洗涤剂中未检测到漆酶活性为止。

3.如权利要求2所述的一种降解玉米秸秆的方法，其特征在于：所述含有漆酶的缓冲溶液是pH为4.6的NaAC-HAC缓冲溶液，Cu²⁺修饰的Fe₃O₄-NH₂-PEI磁性纳米粒子与NaAC-HAC缓冲液的质量体积比为1mg：10mL，漆酶的浓度为0.5-4mg/mL。

4.如权利要求1所述的一种降解玉米秸秆的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将玉米秸秆机械粉碎后，过40目筛，然后在105℃下干燥后备用；

（2）将漆酶固定在Cu²⁺修饰的Fe₃O₄-NH₂-PEI磁性纳米粒子上，形成固定化漆酶，具体是将Cu²⁺修饰的Fe₃O₄-NH₂-PEI磁性纳米粒子溶解于含有漆酶的NaAC-HAC缓冲溶液中，在25℃下以150转/min的速率振荡处理40-70min；反应后将制得的Cu²⁺修饰的Fe₃O₄-NH₂-PEI漆酶磁性纳米颗粒和上清液分离；用超纯水对Cu²⁺修饰的Fe₃O₄-NH₂-PEI漆酶磁性纳米颗粒连续洗涤，直到洗涤剂中未检测到漆酶活性为止；其中NaAC-HAC缓冲液pH为4.6，漆酶的浓度为0.5-4mg/mL，Cu²⁺修饰的Fe₃O₄-NH₂-PEI磁性纳米粒子与NaAC-HAC缓冲溶液的质量体积比为1mg：10mL；

（3）将步骤（2）制备的固定化漆酶、步骤（1）处理的玉米秸秆和NaAC-HAC缓冲液在35℃下以160转/min速率下进行振荡处理12～72h；漆酶添加量10-60 Ug^-1，玉米秸秆与NaAC-HAC缓冲液的质量体积比为 1g：200μL；

（4）经步骤（3）处理后，用磁铁吸附回收固定化漆酶，将回收了固定化漆酶的玉米秸秆洗涤后用清水煮沸20-30min，冷却后用0.1%的NaOH溶液进行洗涤，玉米秸秆与NaOH的质量体积比为1g：50mL；

（5）在经步骤（4）处理后的玉米秸秆中加入纤维素酶，在50℃下以140转/min的速率下振荡处理72h，纤维素酶的添加量为30fpu/g。