[发明专利]一株高产γ-谷氨酰转肽酶的干酪乳杆菌及其在L-茶氨酸生产中的应用

权利要求书

1.一株高产γ-谷氨酰转肽酶的干酪乳杆菌Lactobacillus casei TH139，分类命名为干酪乳杆菌（Lactobacillus casei），已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期为2019年10月15日；保藏编号为CGMCC No.18686。

2.利用权利要求1所述的干酪乳杆菌生产L-茶氨酸的方法，其特征在于：采用如下步骤：

（1）细胞培养和收集：取300 μL干酪乳杆菌菌液接入30 mL LBS培养基中，pH7.0，37℃，200 r/min条件下培养8-10 h后，再取30 mL种子液接种于3 L发酵培养基中，pH7.0，37℃，200 r/min条件下培养14-16 h后，冷冻离心获得菌体细胞；

（2）生物转化制备L-茶氨酸：取40-60 g菌体细胞置于1 L含有50-65 g/L L-谷氨酰胺、15-20 g/L乙胺、pH 9.0的Tris-HCl缓冲液中，40℃、100 r/min条件下反应8~12 h后，离心留上清液；

（3）L-茶氨酸的分离提取：将反应上清液流经截留分子量为300 Da的纳滤膜截留其中的可溶性蛋白；将膜滤过液流经阳离子交换树脂吸附其中的L-茶氨酸，再使用1%的氨水进行洗脱；将洗脱液用药用活性炭脱色至透光率90%以上后，浓缩结晶获得L-茶氨酸成品。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤一所述发酵培养基包含的成分及其含量分别为：葡萄糖18-20 g/L，蛋白胨8-10 g/L，酵母粉5-7 g/L，柠檬酸铵2-4 g/L，乙酸钠1-2 g/L，磷酸氢二钾2-4 g/L，硫酸镁0.5-1 g/L，硫酸锰0.2-0.5 g/L。

4.根据权利要求1所述的干酪乳杆菌在L-茶氨酸生产中的应用。