[发明专利]一种膀胱肿瘤化疗药物筛选的芯片器官模型及其制作方法

权利要求书

1.一种膀胱肿瘤化疗药物筛选的芯片器官模型，包括表面修饰塑料或玻璃底座(1)和PDMS膜(4)，其特征在于：所述PDMS膜(4)设置于表面修饰塑料或玻璃底座(1)的顶部，该PDMS膜(4)的一端开设有换液槽出口(3)，另一端开设有换液槽出口(5)，所述PDMS膜(4)和表面修饰塑料或玻璃底座(1)之间从左至右依次设置有导流柱(2)、标记柱(7)、挡板(6)。

2.根据权利要求1所述的一种膀胱肿瘤化疗药物筛选的芯片器官模型的制作方法，其特征在于：所述制作方法如下：

步骤一：将准备好的40-70μm的膀胱癌类器官用ECM培养基在体外培养24h；

步骤二：将制作完成的PDMS膜芯片进行高温高压消毒后置于烘箱烘烤；

步骤三：将PDMS膜芯片进行真空准备，导入100μlECM培养基(含1％胶原)，放入培养箱孵育24h；

步骤四：将备好的40-70μm膀胱癌类器官导入PDMS膜芯片，放入培养箱培养24h；

步骤五：将构建成功的器官芯片用于化疗药物筛选。

3.根据权利要求2所述的一种膀胱肿瘤化疗药物筛选的芯片器官模型的制作方法，其特征在于：所述步骤二中，将制作完成的PDMS膜芯片进行高温高压消毒后置于120℃烘箱烘烤2h。

4.根据权利要求2所述的一种膀胱肿瘤化疗药物筛选的芯片器官模型的制作方法，其特征在于：所述步骤三中，将PDMS膜芯片进行真空准备30min。

5.根据权利要求2所述的一种膀胱肿瘤化疗药物筛选的芯片器官模型的制作方法，其特征在于：所述步骤一中，准备好的40-70μm的膀胱癌类器官培养方法如下：

1)通过手术获得新鲜膀胱癌电切或全切肿瘤组织，保存于组织保存液；

2)30min内在细胞培养基(10％血清，2％双抗)环境下对肿瘤组织进行手动机械切碎；

3)用胶原酶I：细胞培养基按1:1比例在恒温摇床上消化切碎的肿瘤组织；

4)将消化好的肿瘤组织离心后用细胞培养基重悬，用70/100μm滤网分别过滤，用PBS(2％双抗)涮洗3次，弃单细胞和大块组织，取70-100μm组织离心后用ECM培养基重悬，放入细胞培养箱培养24h。

6.根据权利要求5所述的一种膀胱肿瘤化疗药物筛选的芯片器官模型的制作方法，其特征在于：所述3)中，用胶原酶I：细胞培养基按1:1比例在37℃恒温摇床上消化切碎的肿瘤组织20min。

7.根据权利要求5所述的一种膀胱肿瘤化疗药物筛选的芯片器官模型的制作方法，其特征在于：所述4)中，将消化好的肿瘤组织离心(1000rpm，4min)后用细胞培养基重悬。