[发明专利]灵菌红素在制备淋巴管肌瘤病细胞增殖抑制剂中的应用

说明书

本发明公开了灵菌红素在制备淋巴管肌瘤病细胞增殖抑制剂中的应用，涉及生物医药领域。本发明通过生物工程技术制得灵菌红素，并使用显微镜观察细胞形态变化，cck‑8法测定细胞活性变化，观察灵菌红素对淋巴管肌瘤病细胞Tsc2null增殖的抑制作用，发现，24h之内，灵菌红素对Tsc2null的抑制效果明显高于Tsc2wt，2h之内，Tsc2null的细胞活性均和灵菌红素的浓度呈反比，灵菌红素浓度越高，细胞活性越低，灵菌红素对淋巴管肌瘤病细胞的增殖具有显著的抑制作用，可见，灵菌红素在制备淋巴管肌瘤病细胞的增殖抑制剂或抗淋巴管肌瘤病细胞的增殖药物中即将具有广泛的应用。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及灵菌红素在制备淋巴管肌瘤病细胞增殖抑制剂中的应用。

背景技术

淋巴管肌瘤病(lymphangioleiomyomatosis,LAM)是一种以弥漫性肺部囊性病变为主的罕见疾病，主要发生在育龄期女性，病理以平滑肌样细胞异常增殖浸润为主要特征。LAM临床表现多样，除了肺内特征性囊性病变之外，亦可累及肾脏、淋巴管及淋巴结、脾脏、肝脏等诸多脏器。研究显示LAM源于患者体内TSC1/TSC2基因突变，其中又以TSC2突变更为常见。TSC为肿瘤抑制基因，TSC-LAM患者先天带有一个位点TSC基因的突变，出生后再次获得第二个位点TSC基因突变而发病。2个等位TSC(特别是TSC2)基因全部失活后，失去抑制作用，进而下游mTOR通路异常激活，刺激LAM细胞异常生长、增殖以及迁移、转移，造成肺内及肺外器官系统的结构破坏和功能障碍。

灵菌红素(Prodigiosin)是一类发现于多种细菌、放线菌的红色抗生素，其骨架特征是含有一个三吡咯环的大共轭体系，具有抗癌、抗真菌、抗细菌、抗原虫以及免疫抑制等多种活性。近年来灵菌红素的抗肿瘤活性尤其受到人们的关注，美国国立癌症研究所(NSI)Melvin等人发现灵菌红素在平均IC₅₀为2.1μmol/L时对57种不同的人癌细胞有抗性作用，同时还发现能诱导细胞的凋亡。目前，灵菌红素对LAM病细胞Tsc2null的增殖的抑制作用尚未研究。

发明内容

针对技术的不足，本发明的目的是提供灵菌红素在制备淋巴管肌瘤病细胞增殖抑制剂中的应用，灵菌红素对LAM病细胞Tsc2null的增殖的抑制效果显著。

为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

灵菌红素在制备淋巴管肌瘤病细胞增殖抑制剂中的应用。

进一步的，淋巴管肌瘤病细胞为Tsc2null细胞。

进一步的，抑制剂中灵红菌素的浓度为0.01-100μmol/L。

灵菌红素在制备抑制淋巴管肌瘤病细胞增殖的药物中的应用。

进一步的，灵菌红素的制备方法为：将粘质沙雷氏菌培养液离心，分离上清液和沉淀；下层沉淀用甲醇浸提，离心分离获得红色素；利用旋转蒸发仪旋蒸，得到深紫红色素甲醇溶液，经C₁₈反相半制备HPLC复纯化，最终得色素溶于无水乙醇，真空低温高速冻干。

有益效果：本发明通过生物工程技术制得灵菌红素，并使用显微镜观察细胞形态变化，cck-8法测定细胞活性变化，观察灵菌红素对LAM病细胞Tsc2null增殖的抑制作用，发现：24h之内，灵菌红素对Tsc2null的抑制效果明显高于Tsc2wt，2h之内，Tsc2null的细胞活性均和灵菌红素的浓度呈反比，灵菌红素浓度越高，细胞活性越低，对淋巴管肌瘤病细胞的增殖具有显著的抑制作用，可见，灵菌红素在制备淋巴管肌瘤病细胞的增殖抑制剂或抗淋巴管肌瘤病细胞的增殖药物中即将具有广泛的应用。

附图说明

图1是24h不同浓度的灵菌红素对Tsc2null细胞的抑制效果图；

图2是48h不同浓度的灵菌红素对Tsc2null细胞的抑制效果图；