[发明专利]一种改造次级翻译起始位点使蛋白正确表达的方法在审
| 申请号： | 201911206084.3 | 申请日： | 2019-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN110863002A | 公开（公告）日： | 2020-03-06 |
| 发明（设计）人： | 刘伟林;刘姗姗;李千;汤建民;吴昔阳;张高英;赵红洲 | 申请（专利权）人： | 武汉赛维尔生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N9/12;C07K14/475;C12R1/19 |
| 代理公司： | 湖北武汉永嘉专利代理有限公司 42102 | 代理人： | 徐晓琴 |
| 地址： | 430060 湖北省武汉市东湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 改造 次级 翻译 起始 位点使 蛋白 正确 表达 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种改造次级翻译起始位点使蛋白正确表达的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）对目的蛋白的基因序列进行基因序列分析，当发现存在类似核糖体结合位点序列加上适当的间隔序列位于起始密码子上游，则判断该基因序列中存在次级翻译起始位点；
（2）将步骤（1）中所述类似核糖体结合位点序列进行同义突变、或者直接去掉类似核糖体结合位点序列，获得新的基因序列；
（3）将步骤（2）所得新的基因序列构建到pET表达载体中，再转化至大肠杆菌中进行蛋白诱导表达，获得正确表达的蛋白。
2.根据权利要求1所述的改造次级翻译起始位点使蛋白正确表达的方法，其特征在于，所述类似核糖体结合位点序列为“AAGGAGG”。
3.根据权利要求1所述的改造次级翻译起始位点使蛋白正确表达的方法，其特征在于，所述适当的间隔序列为5~13个碱基序列。
4.根据权利要求1所述的改造次级翻译起始位点使蛋白正确表达的方法，其特征在于，所述起始密码子为AUG或GUG。
5.根据权利要求1所述的改造次级翻译起始位点使蛋白正确表达的方法，其特征在于，所述同义突变指将碱基序列“CAGGAG”突变成碱基序列“CAAGAA”。
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